[发明专利]高效促进丹参酮积累的基因SmWRKY61及其用途

说明书

本发明公开了一种促进丹参酮积累的基因SmWRKY61，该基因的核苷酸序列如SEQ IDNO:1所述。本发明还同时公开了基因SmWRKY61在促进丹参酮积累中的应用：促进隐丹参酮、丹参酮I、丹参酮IIA的积累。

技术领域

本发明属于生物领域，特别涉及一种高效促进丹参酮积累的基因SmWRKY61及其用途。

背景技术

WRKY蛋白家族的名字来源于高度保守的60个氨基酸长的WRKY结构域，其在C末端含有新的锌指状基序。过表达AaWRKY1可以显著提高青蒿素的含量，SmWRKY1的过表达显着提高了SmDXS和SmDXR基因表达和丹参酮积累。但是促进效果仍然有待改善。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种可以大幅促进丹参酮积累的SmWRKY基因及其用途。

为了解决上述技术问题，本发明提供一种促进丹参酮积累的SmWRKY61基因，其核苷酸系列如SEQV ID NO:1所述。

本发明还同时提供了上述SmWRKY61的用途：促进(高效促进)丹参酮积累。

作为本发明的SmWRKY61的用途的改进：促进隐丹参酮、丹参酮I、丹参酮IIA的积累。

本发明通过转录组发现，绒毛鼠尾草和丹参中共有8个WRKY基因表达差异显著，其中SmWRKY61在转录组水平上表达量高达丹参的17.39倍，进一步的RT-PCR验证结果表明，WRKY61在绒毛鼠尾草中表达量是丹参的几千倍，为此，本发明采用基因过表达的方法研究了SmWRKY61对丹参酮积累的调控作用，结果发现SmWRKY61可以将丹参酮I的含量提高11.09倍，丹参酮IIA的含量提高。

本发明具有如下优势：

1、SmWRKY61促进隐丹参酮积累，从对照水平0提高到0.03mg/g；

2、SmWRKY61促进丹参酮I积累，提高约11倍；

3、SmWRKY61促进丹参酮IIA积累，提高约33倍。

综上所述，本发明利用基因过表达的方法发现了一个可以更加显著促进丹参酮I、丹参酮IIA和隐丹参酮积累的SmWRKY61。与现有已报到的WRKY42和WRKY1等基因的促进效果相比，本发明SmWRKY61的促进效果更强，对隐丹参酮、丹参酮IIA和丹参酮I含量的提高幅度更大。

附图说明

下面结合附图对本发明的具体实施方式作进一步详细说明。

图1是SmWRKY61基因的cDNA扩增电泳图；

图2是SmWRKY61的生物信息分析图；

图2中：

A为SmWRKY61蛋白序列；

B、C、D为SmWRKY氨基酸组成成分分析；

E为SmWRKY三级结构预测；

F为SmWRKY亚细胞定位。

图3SmWRKY61过表达丹参毛状根株系图；

图4SmWRKY61过表达毛状根鉴定电泳图；

图5转基因毛状根和野生丹参毛状根的次生代谢物含量图。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于此：

实验材料：

1.1植物材料