[发明专利]一种干酪乳杆菌WLCA02及应用

说明书

本发明公开了一种干酪乳杆菌WLCA02及应用。该干酪乳杆菌WLCA02已于2020年12月10日保藏在中国武汉大学的中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2020884。本发明发现的干酪乳杆菌WLCA02对于鼠伤寒沙门氏菌具有很好的拮抗作用，还可用于热灭活安全菌制剂的制备，规避了使用抗生素所带来的风险。

技术领域

本发明属于微生物领域，具体涉及一种干酪乳杆菌WLCA02及应用。

背景技术

鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella Typhimurium)是革兰氏阴性杆菌，兼性厌氧，周生鞭毛，具有较好的运动性，同时具有良好的耐酸性能，对环境适应性强，广泛存在于自然环境中。沙门氏菌是肠杆菌科中较为重要的肠道致病菌。据2018年世界卫生组织(WHO)报道，沙门氏菌(非伤寒)感染每年引起5.5亿人患肠道疾病，导致3300万人死亡。目前对鼠伤寒沙门氏菌的控制，主要集中在感染后的抗生素处理，但由于近年来超级细菌的出现，鼠伤寒沙门氏菌耐药性的进一步提高，引起大家的关注与担忧，因此如何规避抗生素使用的风险成为防治微生物感染的研究热点。

发明内容

本发明的目的是解决现有技术的不足，提供一株干酪乳杆菌，其具有良好的益生功能，可通过降低鼠伤寒沙门氏菌的黏附率和内化率，提高肠上皮细胞紧密连接蛋白的转录及表达水平，发挥其拮抗鼠伤寒沙门氏菌的作用。

本发明的干酪乳杆菌WLCA02(Lactobacillus casei WLCA02)，已于2020年12月10日保藏在中国武汉大学的中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2020884。其16S rDNA的碱基序列如SEQ ID No：1所示。

本发明的干酪乳杆菌WLCA02可以在MRS琼脂培养基上生长，为革兰氏阳性菌，兼性厌氧生长，不产芽孢。为维持时间稳定地保存本发明干酪乳杆菌优良性能，将其保存在含有15％甘油的混合保存液中，于-80℃冻存，或将其用10％脱脂乳进行冻干保存。

为了对微生物进行鉴定和分类，对本发明所述干酪乳杆菌WLCA02进行了16S rDNA序列分析，结果为，与干酪乳杆菌(Lactobacillus casei strain Pro43)具有最高的同源性(99％)，显示出与干酪乳杆菌最高的分子系统学上的亲缘关系。因此，将此微生物鉴定为干酪乳杆菌，并命名为干酪乳杆菌WLCA02。

本发明的益生菌干酪乳杆菌WLCA02，在巴氏消毒处理后也具有较好的拮抗鼠伤寒沙门氏菌的作用。因此，本发明的干酪乳杆菌可用于热灭活安全菌制剂。

本发明的有益效果为：本发明发现的干酪乳杆菌WLCA02对于鼠伤寒沙门氏菌具有很好的拮抗作用，还可用于热灭活安全菌制剂的制备，规避了使用抗生素所带来的风险。

附图说明

图1所示为干酪乳杆菌WLCA02体外抑制鼠伤寒沙门氏菌生长的情况图；

图2所示为干酪乳杆菌WLCA02降低鼠伤寒沙门氏菌对HT-29细胞的粘附率和内化率的影响情况图；

图3所示为干酪乳杆菌WLCA02降低C57B/6小鼠肠道，MLN、肝和脾脏中鼠伤寒沙门氏菌的载量情况图；

图4所示为干酪乳杆菌WLCA02缓解鼠伤寒沙门氏菌感染的C57BL/6小鼠的肠道损伤情况图；

图5所示为干酪乳杆菌WLCA02降低鼠伤寒沙门氏菌感染的C57BL/6小鼠肠道通透性情况图；

图6所示为干酪乳杆菌WLCA02提高结肠紧密连接蛋白ZO-1和Claudin-1的转录水平情况图。

具体实施方式

以下将结合实施例和附图对本发明的构思及产生的技术效果进行清楚、完整的描述，以充分地理解本发明的目的、方案和效果。