[发明专利]一种细胞核靶向碳点、制备及应用

权利要求书

1.一种细胞核靶向碳点的制备方法，其特征在于：以间苯二胺和盐酸氨基脲为原料，无水乙醇为溶剂，通过一步溶剂热法合成细胞核靶向碳点。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：间苯二胺溶于无水乙醇中浓度为52mM，盐酸氨基脲溶于无水乙醇中浓度为81 mM。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：反应温度为180 ℃，反应12 h。

4.权利要求1-3任一项所述的制备方法制备的碳点。

5.权利要求4所述的碳点在细胞核的成像试剂中的应用。

6.权利要求4所述的碳点在细胞铁死亡过程中核酸结构的成像检测试剂中的应用。

7.权利要求4所述的碳点在对ROS稳定性研究中的应用。

8.根据权利要求5或6所述的应用，其特征在于，具体步骤如下：

（1）把4μg/ mL荧光碳点与细胞共同孵育，通过共聚焦显微镜观察碳点进入活细胞的时间；

（2）把4μg/ mL荧光碳点与细胞共同孵育25min后，使用458nm激光持续扫描30次，观察荧光强度的变化；

（3）把4μg/ mL荧光碳点与细胞共同孵育25min，然后加入细胞核商染NucRed™ Live647，通过共聚焦显微镜观察碳点在细胞中的分布情况；

（4）将细胞分别用DNAse和RNAse消化后，把4μg/ mL荧光碳点与细胞共同孵育25min，通过共聚焦显微镜观察碳点在细胞中的分布情况；

（5）将细胞用铁死亡诱导剂Erastin孵育后，把4μg/ mL荧光碳点与细胞共同孵育25min，通过共聚焦显微镜观察碳点在细胞中的分布情况。

9.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，具体步骤如下：

（1）将碳点的储备液稀释在PBS缓冲中，使终浓度为10 μg/ mL，得到混合液A；

（2）将各ROS溶液分别加入到混合液A，得到一系列混合液；

（3）将步骤（2）中得到的混合液转移至荧光比色皿中，利用荧光分光光度计，测量荧光强度；

（4）将DNA溶液加入到混合液A，得到一系列混合液B；

（5）将混合液B转移至荧光比色皿中，利用荧光分光光度计，测量荧光强度；

（6）将各ROS溶液加入到混合液B，得到一系列混合液；

（7）将步骤（6）中得到的混合液转移至荧光比色皿中，利用荧光分光光度计，测量荧光强度。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：所述步骤（1）中PBS缓冲溶液的浓度为10mM，pH范围为7.2-7.4；步骤（2）中各ROS溶液的浓度为100 μM，步骤（3）中所用激发波长为455 nm，步骤（4）中DNA溶液的浓度为100μg/ml。