[发明专利]一种2,3-O-异亚丙基-D-核糖酸-γ-内酯的重结晶方法

说明书

本发明提供了一种2,3‑O‑异亚丙基‑D‑核糖酸‑γ‑内酯的重结晶方法，包含以下步骤：a、将含有2,3‑O‑异亚丙基‑D‑核糖酸‑γ‑内酯的粗品溶于酯类溶剂得到含有2,3‑O‑异亚丙基‑D‑核糖酸‑γ‑内酯的溶液；b、在含有2,3‑O‑异亚丙基‑D‑核糖酸‑γ‑内酯的溶液中加入反溶剂后降温至析晶温度析出固体；c、从固体中筛选析出颗粒状的晶体。本发明的方法操作简单，适合大规模生产；得到的产物纯度、产率高。

技术领域

本发明涉及重结晶技术领域，具体涉及一种2,3-O-异亚丙基-D-核糖酸-γ-内酯的重结晶方法。

背景技术

近年来，mRNA药物作为医药界的新兴领域引起了很多关注。随着新冠mRNA疫苗的横空出世，其经济、灵活、高效、易于大规模生产的特点使其成为当下医药界的热门。为了解决mRNA药物的免疫原性问题，目前技术会采用一些化学修饰的核苷(如5-甲基胞嘧啶核苷(m5C)、假尿苷(Ψ)等)来代替天然核苷，在降低药物的免疫原性的同时，不影响甚至提高翻译效率。这些核苷的主体结构D-(+)-核糖，由中间体2,3-O-异亚丙基-D-核糖酸-γ-内酯引入。在现有技术中，如Batra H,Moriarty R M,Penmasta R等人在“A Concise,Efficientand Production-Scale Synthesis of a Protected l-Lyxonolactone Derivative:AnImportant Aldonolactone Core”中所公开的合成方法，该中间体是D-(+)-核糖酸-γ-内酯与丙酮在硫酸催化下反应生成。

将通过该方法制得产物通过色谱柱分离后得到两种产物，将这两种产物进行核磁分析可以得到图1和图2所示的谱图，其中图1为目标产物，图2为杂质，并结合杂质的质谱图(图3)可以得知，最终产物除了目标化合物，还含有同分异构体的杂质。

该杂质的存在会影响后续反应且会消耗更多的物料，不利于放大生产。然而同分异构体的杂质分离纯化难度大，需要色谱柱进行分离，这无疑又增加了生产成本。

发明内容

为了克服上述问题，本发明提供了一种2,3-O-异亚丙基-D-核糖酸-γ-内酯的重结晶方法,包含以下步骤：

a、将含有2,3-O-异亚丙基-D-核糖酸-γ-内酯的粗品溶于酯类溶剂得到含有2,3-O-异亚丙基-D-核糖酸-γ-内酯的溶液；

b、在含有2,3-O-异亚丙基-D-核糖酸-γ-内酯的溶液中加入反溶剂后降温至析晶温度析出固体；

c、从固体中筛选析出颗粒状的晶体。

优选地，在降温至析晶温度前先降温至养晶温度培养晶核。

养晶温度为溶液开始析出晶核时的温度，并在该温度下培养一段时间的晶核有利于提高后续降温析晶时的纯度和产率。

优选地，将含有2,3-O-异亚丙基-D-核糖酸-γ-内酯的粗品溶于高于40℃酯类溶剂得到含有2,3-O-异亚丙基-D-核糖酸-γ-内酯的溶液。优选地，溶剂温度高于40℃，低于沸点。优选地低于80℃酯类溶剂。优选地为75～80℃酯类溶剂。

优选地，在晶核培养完成后加入反溶剂。

优选地，所述的反溶剂为烷烃类溶剂。

优选地，所述酯类溶剂为乙酸乙酯，乙酸丙酯、乙酸叔丁酯中的一种或多种，优选为乙酸乙酯。

优选地，所述反溶剂为碳原子数少于16的烷烃类溶剂，优选为正庚烷，正己烷、环己烷、石油醚，更为优选为正己烷。

优选地，所述酯类溶剂的体积(ml)与所述粗品的质量(g)之比大于1：1(ml：g)；优选地大于1：1(ml：g)，不高于4：1(ml：g)。