[发明专利]一种抗CLD18A2单域抗体及其抗肿瘤用途

权利要求书

1.一种抗CLD18A2单域抗体，所述抗CLD18A2单域抗体的互补决定区CDR包括氨基酸序列如下所示的CDR1～CDR3：

氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示的CDR1，氨基酸序列如SEQ ID NO.22所示的CDR2，氨基酸序列如SEQ ID NO.36所示的CDR3。

2.如权利要求1所述的单域抗体，其特征在于，所述抗CLD18A2单域抗体包括框架区FR，所述框架区FR包括氨基酸序列如下所示的FR1～FR4：

氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的FR1，氨基酸序列如SEQ ID NO.15所示的FR2，氨基酸序列如SEQ ID NO.30所示的FR3，氨基酸序列如SEQ ID NO.41所示的FR4。

3.如权利要求1所述的单域抗体，其特征在于，所述抗CLD18A2单域抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO.45所示。

4.如权利要求1所述的单域抗体，其特征在于，所述抗CLD18A2单域抗体为人源化抗体。

5.如权利要求4所述的单域抗体，其特征在于，所述CLD18A2单域抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO.70、78或86所示。

6.一种抗CLD18A2单域抗体的融合蛋白，包括如权利要求1～5任一权利要求所述的单域抗体的第一结构域，还包括用于延长体内半衰期和/或对效应细胞具有结合作用的第二结构域。

7.如权利要求6所述的融合蛋白，其特征在于，所述第二结构域包括血清白蛋白片段、聚乙二醇片段、结合HSA的单域抗体中的一种或多种的组合；

和/或，所述第二结构域包括免疫球蛋白Fc区；

和/或，所述第二结构域包括对T细胞上存在的CD3具有亲和力和/或能够与T细胞上存在的CD3结合的分子。

8.如权利要求7所述的融合蛋白，其特征在于，所述免疫球蛋白Fc区为人免疫球蛋白Fc区。

9.如权利要求8所述的融合蛋白，其特征在于，所述人免疫球蛋白Fc区中包括用于改变Fc介导的效应功能的突变，所述效应功能包括CDC活性、ADCC活性、ADCP活性中的一种或多种的组合；

和/或，所述免疫球蛋白选自IgG、IgA1、IgA2、IgD、IgE、IgM中的一种或多种的组合，所述IgG选自IgG1、IgG2、IgG3或IgG4亚型中的一种或多种的组合；

和/或，所述免疫球蛋白Fc区的氨基酸序列选自SEQ ID NO.91～95其中之一；

和/或，所述第一结构域和第二结构域之间设有连接肽，所述连接肽选自由丙氨酸和/或丝氨酸和/或甘氨酸组成的柔性多肽链。

10.如权利要求9所述的融合蛋白，其特征在于，所述连接肽的长度为3～40个氨基酸。

11.一种分离的多核苷酸，编码如权利要求1～5任一权利要求所述的单域抗体、或编码如权利要求6～10任一权利要求所述的融合蛋白。

12.一种表达载体，含有如权利要求11所述的分离的多核苷酸。

13.一种表达系统，所述表达系统含有如权利要求12的表达载体或基因组中整合有外源的如权利要求11所述的多核苷酸。

14.如权利要求1～5任一权利要求所述的单域抗体、或如权利要求6～7任一权利要求所述的融合蛋白的制备方法，包括如下步骤：在适合表达所述抗体或融合蛋白的条件下，培养如权利要求13所述的表达系统，从而表达出所述的抗体或融合蛋白，纯化分离出所述的抗体或融合蛋白。