[发明专利]一种固定化酶载体、固定化酶以及制备方法

权利要求书

1.一种固定化酶载体，其特征在于，所述固定化酶载体通过以下方法制备：

(1a)制备壳聚糖溶液；

(1b)制备含有Fe²⁺以及Fe³⁺的溶液，将步骤(1a)的壳聚糖溶液加入含有铁离子溶液中，得到混合溶液，壳聚糖在混合溶液中的浓度为0.015-0.025g/mL；随后向所得混合溶液中加入ESMP，搅拌溶解，壳聚糖以及ESMP的质量比为1-3:1-3，搅拌均匀后，加入氨水进行初步沉淀，再加入氢氧化钠溶液进行二次沉淀，得到颗粒状载体；

(1c)将步骤(1b)所得的载体洗涤后加入京尼平溶液中浸润，得到固定化酶载体。

2.根据权利要求1所述的固定化酶载体，其特征在于，步骤(1c)中，所述京尼平溶液的浓度为10-50mmol/L。

3.根据权利要求1所述的固定化酶载体，其特征在于，步骤(1b)中，所述Fe²⁺在混合溶液中的浓度为0.1-0.2mol/L，Fe³⁺在混合溶液中的浓度为0.2-0.4mol/L。

4.根据权利要求4所述的固定化酶载体，其特征在于，所述Fe²⁺与Fe³⁺的摩尔比为2:1。

5.根据权利要求1所述的固定化酶载体，其特征在于，步骤(1b)中，所述壳聚糖以及ESMP的质量比为1：2。

6.根据权利要求1所述的固定化酶载体，其特征在于，步骤(1b)中，所述初步沉淀的温度控制在75-85℃。

7.如权利要求1所述的固定化酶载体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(2a)制备壳聚糖溶液；

(2b)制备含有Fe²⁺以及Fe³⁺的溶液，将步骤(2a)的壳聚糖溶液加入含有铁离子溶液中，得到混合溶液，壳聚糖在混合溶液中的浓度为0.015-0.025g/mL；随后向所得混合溶液中加入ESMP，壳聚糖以及ESMP的质量比为1-3:1-3，搅拌均匀后，加入氨水进行初步沉淀，再加入氢氧化钠溶液进行二次沉淀，得到颗粒状载体；

(2c)将步骤(2b)所得的载体洗涤后加入京尼平溶液中浸润，得到固定化酶载体。

8.一种固定化酶，其特征在于，将游离酶溶液与权利要求1所述的固定化酶载体交联而成。

9.根据权利要求8所述的固定化酶，其特征在于，所述游离酶为β-葡萄糖苷酶。

10.一种固定化酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(3a)制备壳聚糖溶液；

(3b)制备含有Fe²⁺以及Fe³⁺的溶液，将步骤(3a)的壳聚糖溶液加入含有铁离子溶液中，得到混合溶液，壳聚糖在混合溶液中的浓度为0.015-0.025g/mL；随后向所得混合溶液中加入ESMP，壳聚糖以及ESMP的质量比为1-3:1-3，搅拌均匀后，加入氨水进行初步沉淀，再加入氢氧化钠溶液进行二次沉淀，得到颗粒状载体；

(3c)将步骤(3b)所得的载体洗涤后加入京尼平溶液中浸润，得到固定化酶载体；

(3d)将步骤(3c)所得的固定化酶载体与β-葡萄糖苷酶溶液孵育，得到固定化β-葡萄糖苷酶。