[发明专利]一株耐盐异养硝化好氧反硝化菌及其应用

说明书

本发明提供一株耐盐异养硝化好氧反硝化菌，属于生物技术领域，其保藏编号为GDMCC NO.61505。本发明从养殖废水中分离出产酸克雷伯菌（Klebsiella oxytoca）YZ‑12，该菌株具有耐盐、异养硝化和好氧反硝化能力，在盐度为30g/L时仍能够生长且部分脱氮，对于150mg/L浓度以下氨氮废水、500mg/L浓度以下硝态氮废水，脱氮率均在97%以上。本发明中的菌株在污水处理中具有潜在的应用前景。

技术领域

本发明涉及一株耐盐异养硝化好氧反硝化菌及其应用，属于环境微生物技术领域。

背景技术

随着水体富营养化问题日益突出,氮素污染的防治越来越受到人们的重视。目前污水脱氮处理方法主要有化学法、生化法及生物物理-物化组合工艺,其中生物脱氮以其经济、高效、无残留污染的特性,成为污水脱氮的主要手段。但是,传统的生物脱氮分硝化和反硝化等不同过程，要求在两个反应器中进行,建设成本高,而且各个步骤需要分别添加碳源、调节酸碱等。

近年来,随着具有异养硝化好氧反硝化特性菌株的发现，利用异养硝化好氧反硝化菌研发污水脱氮技术日益成为研究热点。和传统硝化微生物相比，异养硝化好氧反硝化菌具有更高的细胞生长速率，并且实现了在同一个反应器中同步完成硝化和反硝化反应，同时将氨氮、硝态氮和亚硝态氮转化为含氮气体。而且，在硝化和反硝化过程中分别产生的酸和碱能相互中和，相对维持水体酸碱平衡，减少pH调节成本。一些特殊异养硝化好氧反硝化菌甚至还具备耐受高氨氮、高盐度、低温和低C/N的特性。这些优势使得异养硝化好氧反硝化菌成为污水脱氮处理的研究热点。

发明内容

本发明提供一株耐盐异养硝化好氧反硝化菌，能应用于污水处理领域。

本发明所提供的产酸克雷伯菌（Klebsiella oxytoca）YZ-12，于2021年7月21日保藏在广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC NO.61505。

本发明所筛选的产酸克雷伯菌YZ-12在污水处理中的应用。

本发明还提供一种应用所述产酸克雷伯菌YZ-12进行污水脱氮处理的方法，所述方法包括如下步骤：

（1）活化产酸克雷伯菌YZ-12；具体地，可以取产酸克雷伯菌YZ-12接种于固体培养基中，在28～35℃的条件下，培养24h，制得活化菌株；所述固体培养基是在LB培养基中添加15～20g/L琼脂粉。

（2）制备种子液；具体地，取步骤(1)制得的活化菌株，接种于种子培养基中，在28～35℃，120～200r/min的条件下，培养12～16h，即得种子液；所述种子培养基可以是：胰蛋白胨1g/L，酵母提取物0.5g/L，硝酸钾0.1g/L，pH7.0～7.5。

（3）污水脱氮处理；具体地，取步骤(2)的种子液，按体积比5％的比例接种于待处理污水中，加入蔗糖为碳源，调节C/N为10～20，pH为6～9，在28～35℃，120～200r/min条件下培养24～48h，取水样检测菌株脱氮效果。

所述产酸克雷伯菌YZ-12还具有一定的耐高盐性，在含30g/L氯化钠脱氮培养基中培养48h，菌株数量可达10⁸cell/mL。

本发明的有益效果：

本发明提供的产酸克雷伯菌YZ-12所具有的特 性非常适合用于污水脱氮处理。其活菌具有耐盐性，在盐度为10g/L时具有良好的硝化能力，盐度小于等于30g/L时具有良好的反硝化能力；菌株还具有较好的酸碱适应范围，在6～9的pH范围内具有良好的脱氮效果；最适碳源为蔗糖；脱氮最适C/N范围为10～20。

附图说明

图1菌株YZ-12平板菌落形态。

图2菌株YZ-12的PCR凝胶电泳图。