[发明专利]水稻茉莉素生物传感器J6V-HM的构建及应用在审
申请号: | 202111030052.X | 申请日: | 2021-09-03 |
公开(公告)号: | CN113862296A | 公开(公告)日: | 2021-12-31 |
发明(设计)人: | 袁政;张大兵;李思齐;曹丽春;梁婉琪 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;C12N15/29;C12N15/65;A01H6/46;G01N21/64 |
代理公司: | 上海汉声知识产权代理有限公司 31236 | 代理人: | 胡晶 |
地址: | 200240 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 水稻 茉莉 生物 传感器 j6v hm 构建 应用 | ||
1.一种茉莉素生物传感器的构建系统,其特征在于:所述构建系统携带多顺反子,包括茉莉素感受元件,以及核内参元件;
所述茉莉素感受元件包括OsJAZ6基因中含有的OsJas6序列、荧光蛋白VENUS编码基因和标签HA编码基因;所述OsJas6序列如序列表中SEQ ID NO.2所示,所述VENUS编码基因如序列表中SEQ ID NO.3所示,所述HA编码基因如序列表中SEQ ID NO.4所示。
2.根据权利要求1所述的构建系统,其特征在于:所述核内参元件包括OsH2B.6编码基因、荧光蛋白mCherry编码基因和启动子Ubiquitin;所述OsH2B.6编码基因如序列表中SEQID NO.5所示;所述mCherry编码基因如序列表中SEQ ID NO.6所示;所述Ubiquitin如序列表中SEQ ID NO.8所示。
3.根据权利要求1所述的构建系统,其特征在于:所述构建系统含有Ubi-1:Jas6-VENUS-6HA:F2A:H2B-mCherry片段,基因序列如序列表中SEQ ID NO.1所示。
4.根据权利要求3所述的构建系统,其特征在于:所述茉莉酸感受元件和核内参元件之间用蛋白独立翻译短肽F2A编码基因序列连接,翻译后分别编码Jas6-VENUS-6HA-F2A蛋白和H2B-mCherry蛋白;所述F2A编码基因,如序列表中SEQ ID NO.7所示。
5.一种含有如权利要求1~4中任一项所述构建系统的编码基因的表达盒、重组菌或重组细胞系。
6.一种含有如权利要求1~4中任一项所述构建系统的重组表达载体,其特征在于,所述重组表达载体为重组表达载体J6V-HM;所述J6V-HM为Ubi-1:Jas6-VENUS-6HA:F2A:H2B-mCherry片段连接在载体pTCK303-6HA中,基因序列如序列表中SEQ ID NO.9所示。
7.根据权利要求6所述的重组表达载体,其特征在于:所述Ubi-1:Jas6-VENUS-6HA:F2A:H2B-mCherry片段为位于SEQ ID NO.9所示序列的第777位至第5369位的核苷酸序列;所述OsJas6序列为位于SEQ ID NO.9所示序列的第2787位至第2870位的核苷酸序列;所述荧光蛋白VENUS编码基因为位于SEQ ID NO.9所示序列的第2922位至第3887位的核苷酸序列;所述标签HA编码基因为位于SEQ ID NO.9所示序列的第3888位至第4109位的核苷酸序列;所述蛋白独立翻译短肽F2A编码基因为位于SEQ ID NO.9所示序列的第4110位至第4175位的核苷酸序列;所述OsH2B.6编码基因为位于SEQ ID NO.9所示序列的第4182位至第4640位的核苷酸序列;所述荧光蛋白mCherry编码基因为位于SEQ ID NO.9所示序列的第4659位至第5369位的核苷酸序列;所述启动子Ubiquitin为位于SEQ ID NO.9所示序列的第777位至第2769位的核苷酸序列。
8.一种如权利要求6所述的重组表达载体在水稻抗逆育种中的应用。
9.一种水稻茉莉素生物传感器株系的构建方法,其特征在于:将权利要求6所述重组表达载体J6V-HM导入水稻愈伤组织中,获得茉莉素生物传感器株系。
10.一种利用权利要求1所述的生物传感器检测茉莉素的方法,其特征在于:通过比较茉莉素感受元件和核内参元件所带荧光蛋白信号的比值计算茉莉素的含量。
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