[发明专利]一种鸭坦布苏病毒病活疫苗冻干保护剂及制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种鸭坦布苏病毒病活疫苗冻干保护剂，由明胶、多聚蛋白胨、胰蛋白胨、酶解酪蛋白、乳糖、蔗糖、硫脲、聚乙烯吡咯烷酮、葡聚糖、山梨醇和注射用水组成；将鸭坦布苏病毒病活疫苗冻干保护剂与鸭坦布苏病毒原液按体积比1:1.5混合分装，经真空冷冻干燥处理得鸭坦布苏病毒病活疫苗。本发明耐热保护剂，各组分相互作用，提高疫苗冻干过程中对温度的耐受性，减少效力损失，冻干前后病毒损失率不超过0.3个滴度，本发明鸭坦布苏病毒病冻干耐热保护剂用于鸭坦布苏病毒病活疫苗，其特点为耐老化程度高，37℃放置15天，物理性状良好，每瓶疫苗的病毒滴度仅下降0.2～0.3个，2～8℃条件下可存放36个月，滴度无明显下降。

技术领域

本发明涉及疫苗耐热保护剂领域，特别是一种鸭坦布苏病毒病活疫苗冻干保护剂及制备方法和应用。

背景技术

坦布苏病毒病俗称“黄病毒病”、“出血性卵巢炎”，最早于2010年在浙江某鸭群被发现，随后证明它是由坦布苏病毒感染引起的。该病可造成产蛋鸭、鹅群产蛋率骤然下降至绝产，亦可引起雏鸭、鹅出现共济失调、瘫痪和死亡。给我国水禽养殖业造成了严重的经济损失。随着鸭群在产前多使用免疫效果更确实的活疫苗进行免疫预防，当前临床上已鲜有该病引起降蛋的案例发生。坦布苏病毒病活疫苗以及大多数兽用活疫苗产品使用常规冻干保护剂。常规保护剂主要成分为脱脂牛奶、蔗糖、明胶等，组方简单、配制简便、易溶性良好，但热稳定性和保护功能差，产品的保存条件较为苛刻，大多需要在-15℃以下保存。在疫苗生产、运输以及使用过程中，如果冷链系统控制不当，疫苗保存环境温度升高，常常导致疫苗效力下降或失效，造成免疫失败。发达国家早在20世纪80年代就开始进行耐热保护剂的研究，目前已经基本采用耐热保护剂生产活疫苗，但由于保护剂的研究和应用均属于专利资料，各国都处于保密状态，耐热冻干保护剂比常规的冻干保护剂更周到地考虑了具有生物活性的制品在较高温度和较长保存时间的情况下，冻干过程可能产生的物理和化学变化对活疫苗存活的影响，通过添加填充剂、防冻剂、抗氧化剂、酸碱调整剂、缓冲剂、羟基中和剂、低分子化合物、高分子化合物等，确保病毒在2～8℃条件下，保存期可达24个月，效价无明显下降，因而其保护性能要比传统保护剂更为优良，从而使活疫苗的储存、运输和使用更方便、经济。随着我国规模化养殖的飞速发展，养殖密度加大，防疫模式也要相应的变化，防疫质量是其中的关键问题，活疫苗的冷链运输及储存温度要求非常高，控制不好直接影响疫苗质量，耐热保护剂的研制开发显得尤为重要。

发明内容

本发明的目的是要解决鸭坦布苏病毒病疫苗因冷链运输控制不好影响疫苗质量的问题，提供一种鸭坦布苏病毒病活疫苗冻干保护剂及制备方法和应用。

为达到上述目的，本发明是按照以下技术方案实施的：

本发明的第一个目的是要提供一种鸭坦布苏病毒病活疫苗冻干保护剂，由以重量百分比计的组份组成：明胶0.8～1.2％、多聚蛋白胨3～6％、胰蛋白胨2～5％、酶解酪蛋白3～6％、乳糖5～10％、蔗糖1～3％、硫脲1～5％、聚乙烯吡咯烷酮0.5～3％、葡聚糖0.1～1％、山梨醇0.1～2％，余量为注射用水。

作为本发明的优选方案，所述鸭坦布苏病毒病活疫苗冻干保护剂，由以重量百分比计的组份组成：明胶1％、多聚蛋白胨4.5％、胰蛋白胨3％、酶解酪蛋白3.5％、乳糖10％、蔗糖3％、硫脲2.5％、聚乙烯吡咯烷酮1.2％、葡聚糖0.6％、山梨醇0.6％，余量为注射用水。

作为本发明的优选方案，所述聚乙烯吡咯烷酮为聚乙烯吡咯烷酮PVPK30。

本发明的第二个目的是要提供一种如权利要求1所述的鸭坦布苏病毒病活疫苗冻干保护剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

用玻璃容器称取配制总体积的3/5蒸馏水，按顺序依次将明胶、多聚蛋白胨、胰蛋白胨、酶解酪蛋白、乳糖、蔗糖、硫脲、聚乙烯吡咯烷酮、葡聚糖、山梨醇加入蒸馏水中，将玻璃容器置于超声波加热水浴中，搅拌加热及超声波高频振动使各组分完全溶解后加入余量注射用水，再进行灭菌处理。