[发明专利]含有基因编辑的脂肪干细胞的药物组合物有效
申请号: | 202111037481.X | 申请日: | 2021-09-06 |
公开(公告)号: | CN113717929B | 公开(公告)日: | 2022-07-12 |
发明(设计)人: | 杨骏;朱成光 | 申请(专利权)人: | 陕西北天生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071;C12N5/10;C07K16/40;C12N15/87;A61K35/39;A61P3/10;A61K31/7016;A61K31/702;A61K31/715 |
代理公司: | 北京华仁联合知识产权代理有限公司 11588 | 代理人: | 王雪芹 |
地址: | 710000 陕西省西安市长*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 含有 基因 编辑 脂肪 干细胞 药物 组合 | ||
1.药盒在制备用于小鼠糖尿病治疗的药物组合物中的用途,所述药盒由胰岛样细胞以及甲壳低聚糖组成;其中,胰岛样细胞采用如下方法制备:所述方法包括(1)制备基因敲除的脂肪间充质干细胞;所述敲除采用CRISPR方法,利用AsCpf1蛋白与gRNA采用电转进行基因敲除,具体的sgRNA序列如SEQ ID NO:1所示;(2)步骤(1)制备的基因敲除的脂肪间充质干细胞培养融合至80%-90%后用组成为100 μg/L β-神经生长因子,4 nmol/L活化素A,10mmol/L尼克酰胺,25 μg/L表皮生长因子,单抗50μg/L的10%FBS的DMEM培养液诱导培养10d,每2d半量换液一次;然后培养基换成组成为10 mmol/L尼克酰胺,10 μg/L碱性成纤维细胞生长因子,单抗50μg/L,1%胰岛素-转铁蛋白-硒的10%FBS的DMEM,继续诱导10d,共诱导20d;其中单抗的轻链可变区序列如SEQ ID NO:2所示,重链可变区序列如SEQ ID NO:3所示;所述药物组合物还含有药学上可接受的载体;具体的药用量为胰岛样细胞的治疗细胞数量1×109个-1×1011个/kg,甲壳低聚糖 60mg/kg。
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