[发明专利]一种油茶花芽的石蜡切片及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种油茶花芽的石蜡切片制作方法，其特征在于，至少包括以下步骤：

(1)取材分割与固定：摘取油茶花芽，剥除萼片，切除油茶花芽部分组织，固定并软化；

(2)第一脱水和第一透明处理：将软化的油茶花芽依次采用梯度酒精进行脱水处理；随后进行透明处理，所述透明剂至少包括正丁醇；

(3)浸蜡：将透明油茶花芽先后浸入分析纯正丁醇-石蜡混合液及纯石蜡溶液中浸泡；

(4)将浸蜡油茶花芽依次经过包埋、修蜡、切片、粘片、展片和烘片处理；

(5)随后进行脱蜡、复水和染色处理；

(6)第二脱水和第二透明处理：将染色的油茶花芽依次采用梯度酒精进行脱水处理；随后进行透明处理，所述透明剂为二甲苯；

(7)封片：使用中性树脂封片，烘干后得到油茶花芽的石蜡切片。

2.根据权利要求1所述的制作方法，其特征在于，在步骤(1)中，纵向切除油茶花芽1/3-1/5体积的组织；

优选地，以切开后露出雄蕊的长度为标准：

对于小于1.1cm的油茶花芽，纵向切除油茶花芽1/5体积的组织；

对于大于1.1cm的油茶花芽，纵向切除油茶花芽1/3体积的组织；

长度小于0.5cm的油茶花芽，不进行切割。

3.根据权利要求1或2所述的制作方法，其特征在于，步骤(2)中所述透明处理具体为：

依次使用透明剂一和透明剂二浸泡脱水后的油茶花芽，至少更换3次，脱水后的油茶花芽与透明剂溶液体积比大于1：10；

其中，透明剂一为分析纯正丁醇和分析纯乙醇按体积比1：1混合的溶液；

透明剂二为分析纯正丁醇。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的制作方法，其特征在于，步骤(3)中所述分析纯正丁醇石蜡混合液为提前在高温环境中融化混合完全的分析纯正丁醇石蜡混合液；

优选地，所述高温环境的温度为75℃-85℃；

优选地，分析纯正丁醇与石蜡的质量体积比为1：1g/mL；

优选地，步骤(3)浸泡完还包括以下步骤：

置于55-65℃环境中烘烤，然后用液体石蜡浸泡后得到浸蜡油茶花芽；

优选地，所述液体石蜡的温度为55-65℃。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的制作方法，其特征在于，步骤(6)中所述透明处理具体为：

依次使用透明剂三和透明剂四浸泡脱水染色后的油茶花芽；

其中，透明剂三为分析纯二甲苯和分析纯乙醇按体积比1：1混合的溶液；

透明剂四为分析纯二甲苯。