[发明专利]DoMYC2在提高铁皮石斛香叶醇含量中的应用

说明书

本发明公开了DoMYC2在提高铁皮石斛香叶醇含量中的应用。转录因子DoMYC2，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。转录因子DoMYC2能与香叶醇合酶DoGES1基因的启动子区G‑box位点相结合，激活DoGES1基因的表达，从而促进香叶醇的生物合成。采用遗传转化技术过量表达DoMYC2基因可以显著增加铁皮石斛花中香叶醇的含量。

技术领域

本发明涉及铁皮石斛转录因子DoMYC2，通过遗传转化技术过量表达DoMYC2基因，可以明显提高铁皮石斛花中香叶醇的含量，属于基因工程技术领域。

背景技术

铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)为兰科多年生草本植物，《神农本草经》、《道藏》、《本草纲目拾遗》、《药性论》、《本草图经》均有记载，是我国传统中药中的一味名贵滋阴补虚药材。铁皮石斛有益胃生津，养肝明目，强筋健骨之功，在我国民间一直用石斛来治疗过各种疑难杂症，也因此被纳入《中华人民共和国药典》的各个版本。

前人研究表明，兰科植物(尤其是蝴蝶兰和铁皮石斛)花中富含香叶醇、芳樟醇及其氧化物等单萜化合物，是其呈香的重要物质基础(Ramya M.,Jang S.,An H.R.,etal.Volatile organic compounds from orchids:From synthesis and function togene regulation.International Journal of Molecular Sciences,2020,21(3):1160)。香叶醇，即3,7-二甲基-2,6-辛二烯-1-醇，为无环单萜化合物。香叶醇是玫瑰系香精的主剂，广泛应用于香精香料、日用化学品及食品添加剂行业。此外，香叶醇入药可用于抗菌、驱虫和改善肺通气(Goff S.A.,Klee H.J.Plant volatile compounds:Sensory cues forhealth and nutritional value？Science,2006,311(5762):815-819)。由于铁皮石斛生长周期长且植株体内香叶醇含量较低，化学合成香叶醇成本过高的现状致使市场上香叶醇供不应求日益明显。如何提高植物源香叶醇含量逐渐成为研究人员关注的热点。

诱导子是提高中药材次生代谢产物的有效策略。研究表明，茉莉酸甲酯(Methyljasmonate,MeJA)处理可有效促进铁皮石斛花中香叶醇的积累(Zhao C.,Yu Z.,Teixeirada Silva J.A.,et al.,Functional characterization of a Dendrobium officinalegeraniol synthase DoGES1 involved in floral scent formation.InternationalJournal of Molecular Sciences,2020,21(15):5419)。香叶醇合酶(Geraniol synthase,GES)是香叶醇生物合成过程中的关键酶。调控萜类物质合成的转录因子主要有AP2/ERF、bHLH、MYB、NAC、WRKY、MYC和bZIP(Chuang Y.C.,Hung Y.C.,Tsai W.C.,et al.PbbHLH4regulates floral monoterpene biosynthesis in Phalaenopsis orchids.Journal ofExperimental Botany,2018,69(18):4363-4377)。然而，目前尚未发现与本发明主题所提及的转录因子DoMYC2调控铁皮石斛香叶醇生物合成的相关报道。因此，本发明在实际解决铁皮石斛源香叶醇紧缺性的问题上具有重要的价值。

发明内容

本发明的第一个目的是克服现有技术的不足，提供一种提高铁皮石斛花中香叶醇含量的铁皮石斛转录因子DoMYC2。

本发明的铁皮石斛转录因子DoMYC2，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

本发明的第二个目的是提供含有所述的转录因子DoMYC2的重组载体。