[发明专利]幽门螺杆菌复合抗原、抗体、制备方法及应用

说明书

本发明提供一种幽门螺杆菌复合抗原，由尿素酶(UreB)、空泡细胞毒素(VacA)、细胞毒素基因A(CagA)、粘附素HpaA和粘附素BabA五种抗原蛋白的全长或部分序列组成；五种抗原蛋白的氨基酸序列分别如SEQ ID No.1、SEQ ID No.2、SEQ ID No.3、SEQ ID No.4和SEQ ID No.5所示。本发明提供的复合抗原具有更高的免疫原性，通过该复合抗原制备的抗Hp卵黄抗体，具有更强的中和Hp的活性，能够同时高效阻断Hp的定植、抑制Hp的活性，进而高效防治Hp感染引起的胃肠疾病。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种幽门螺杆菌复合抗原、抗体、制备方法及应用。

背景技术

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)是一种螺旋形、对生长条件要求苛刻的革兰氏阴性微需氧杆菌，是迄今发现能够在人胃内生存的唯一微生物种类，由BarryMarshall和Robin Warren在1982年首次分离得到。Hp可引发多种消化道疾病甚至胃癌，全球感染率超过50％，其耐药性持续升高导致根除率不断下降，进而促使大量顽固性感染发生，严重威胁人类健康。

Hp持续性地定植于人胃及十二指肠黏膜，通过释放空泡毒素(VacA)、细胞毒素相关基因A蛋白(CagA)等毒力因子造成胃上皮细胞的空泡变性、非正常增殖分化等直接损伤，以及诱发胃黏膜炎症导致间接损伤，继而引发相关的胃部疾病。

世界卫生组织(WHO)于1994年就已将Hp列入I类致癌因子。随着对Hp认识的不断深入，于2015年《京都全球共识》明确Hp胃炎为一种慢性传染性疾病，建议对于Hp感染者，除非有抗衡因素(高龄、基础疾病、再感染等)，都应进行根除治疗。

目前用于治疗Hp感染的药物主要分为3类：抗生素、质子泵抑制剂(proton-pumpinhibitor,PPI)及铋剂。目前临床常用治疗方案是将这3种类型药物以合适的比例配伍使用，并设置适宜的给药间隔，以期达到理想的清除效果。

H.pylori主要定植在人胃内，其外膜表面的尿素酶能将环境中的尿素分解为氨和二氧化碳，进而形成“氨云”围绕在H.pylori表面，营造H.pylori周围接近中性的微环境，保护H.pylori免受胃酸侵蚀。与此同时，大多数抗菌药物在胃内的极端强酸环境下活性降低甚至失活。

除了能对抗极酸的pH环境，H.pylori也能应对周期性胃排空。这是因为H.pylori依靠其螺旋形态与有力的鞭毛可以持续地运动，并穿透接近200μm的胃黏液层后锚定于胃黏膜上皮细胞表面(偏中性pH环境)，不仅有效避免了胃酸侵蚀，还显著降低了胃排空的影响。相反地，定期的胃排空却使抗菌药物很难存在于胃内，降低了其在感染部位的蓄积浓度。由于H.pylori定植在黏液层深处，机械隔绝了抗菌药物对菌体的有效接触，使药物难以发挥药效，进一步增大了根除胃内H.pylori的难度。