[发明专利]螺旋富贵草碱A在制备抗肝癌药物中的应用

说明书

本发明公开了螺旋富贵草碱A在制备抗肝癌药物中的应用，通过多项实验对螺旋富贵草碱A进行了进一步的药理和临床研究，活性筛选浓度为2.5μM时螺旋富贵草碱A对肝癌细胞具有明显抑制活性，并首次发现其抗肝癌作用机制不是细胞自噬和副凋亡，也不是经典细胞凋亡和DNA损伤的死亡方式，探究并推测螺旋富贵草碱A诱导肿瘤组织出现的巨泡主要是源于巨胞饮所致的巨泡式死亡，继而产生抑制肿瘤生长的效果。本发明的实验研究展示了螺旋富贵草碱A具有发展成为抗癌新药的潜质，为开发治疗肝癌的药物奠定了基础。

技术领域

本发明属于中药领域，具体涉及一种螺旋富贵草碱A在制备抗肝癌药物中的应用。

背景技术

癌症是严重威胁人们生命健康的恶性疾病，因其居高不下的发病率和死亡率已被列为全世界热点问题。在癌症的治疗中，我国的民族药已形成特有的中国抗癌治疗模式。贵州特色苗族药材三角咪(Pachysandra axillaries Franch.)属于黄杨科三角咪属(板凳果属)植物多毛板凳果的干燥根茎或全草，三角咪中含有丰富的化学成分，主要以甾体类生物碱、挥发油居多。在《中国苗族药物彩色图集》记载道，其具有祛风除湿，活血止痛之功效。但是关于三角咪中的甾体生物碱的抑制癌症活性研究报道较少。我们发现，三角咪富含生物碱，分离纯化得到了6个生物碱化合物(龚小见.柳叶白前和多毛板凳果的化学成分研究.贵州大学,2006)，在近期的活性筛选中发现其中一个生物碱螺旋富贵草碱A具有显著的抗肝癌细胞作用。“巨泡式死亡”源于希腊语，首次发现是在神经胶质母细胞瘤中。巨泡式死亡形式中，最显著的特征是产生许多的小泡，这种小泡会不断增多，相互融合，最终形成大的空泡，但对其在形态学特征、所涉及的蛋白或通路等方面的影响不清楚。

发明内容

本发明的目的在于提供螺旋富贵草碱A在制备抗肝癌药物中的应用，其对肝癌细胞具有明显抑制活性，有望开发成为肝癌新药；并首次发现螺旋富贵草碱A抗肝癌作用是一种新型的巨胞饮的巨泡式死亡机制。

为达到以上技术目的，本发明的技术方案为：

螺旋富贵草碱A在制备抗肝癌药物中的应用，所述螺旋富贵草碱A的结构式如下:

前述应用，所述肝癌为MHCC97H细胞相关的癌症。

前述应用，所述螺旋富贵草碱A按以下方法制备：三角咪药材先用75％乙醇加热回流提取3次，合并滤液减压蒸馏至干燥浸膏，浸膏再经硅胶柱层析分离纯化得螺旋富贵草碱A纯品。

前述应用，所述螺旋富贵草碱A按以下方法制备：取三角咪药材用75％乙醇加热回流提取3次，每次2h，合并滤液减压蒸馏至干燥浸膏，加水稀释，用正丁醇萃取，正丁醇萃取物经硅胶柱层析分离，得螺旋富贵草碱A粗品，再经硅胶柱层析纯化，得螺旋富贵草碱A纯品。

前述应用，所述螺旋富贵草碱A按以下方法制备：取三角咪药材，加入5-10倍药材重量75％乙醇，加热回流提取3次，每次2h，合并滤液减压蒸馏至干燥浸膏，将浸膏加水稀释，用正丁醇萃取3次，回收溶剂后得正丁醇萃取物，正丁醇萃取物经硅胶柱层析，以V_氯仿：V_甲醇＝1:1为洗脱剂，得螺旋富贵草碱A粗品；螺旋富贵草碱A粗品再经硅胶柱层析，以V_石油醚：V_丙酮：V_二乙胺＝20:5:1为洗脱剂，得螺旋富贵草碱A纯品。

前述应用，所述螺旋富贵草碱A以单体或组合物形式入药，加入药用载体或赋形剂。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：