[发明专利]甘草查尔酮A在抗水产养殖动物嗜水气单胞菌感染中的应用

说明书

本发明公开了甘草查尔酮A在抗水产养殖动物嗜水气单胞菌感染中的应用，甘草查尔酮A可在不抑制嗜水气单胞菌生长的浓度下直接抑制嗜水气单胞菌主要毒力因子气溶素的生物活性，细胞生物学试验发现甘草查尔酮A可剂量依赖性的降低气溶素介导的细胞损伤，进一步构建了嗜水气单胞菌感染动物模型发现甘草查尔酮A治疗可显著提高感染动物的存活率。甘草查尔酮A是中药甘草的主要化学成分之一，属于黄酮类化合物，其安全性较高且具有多种生物学活性，可作为药物用于防治水产养殖动物嗜水气单胞菌感染。

技术领域

本发明属于水产养殖技术领域，具体涉及甘草查尔酮A在抗水产养殖动物嗜水气单胞菌感染中的应用。

背景技术

甘草查尔酮A是一种黄酮类化合物，是中药甘草的主要活性成分，具有多种生物学活性，如抗菌、抗炎和抗病毒等。甘草，味甘，性平，是一种常见的中药材，在我国分布广泛，具有补脾益气、清热解毒、却痰止咳等功效，可用于治疗咳嗽痰多、痈肿疮毒、脾胃虚弱等疾病。

嗜水气单胞菌是一种常见的条件性致病菌，广泛分布于自然界中，能导致陆生动物、鱼类和人的多种疾病，其中对水产养殖业的危害最大。嗜水气单胞菌是淡水水产养殖的主要条件性致病菌之一，能导致多种淡水养殖动物的感染性疾病，对水产养殖业的健康发展造成了极大的威胁。长期以来，水产养殖业嗜水气单胞菌感染的治疗均依赖于化学抗菌药物，但由于药物的不合理使用导致了耐药性的产生和药物的残留，限制了化学抗菌药物的使用。

嗜水气单胞菌的致病力是由其携带的毒力因子、粘附因子等所组成，大量研究表明嗜水气单胞菌缺失气溶素后其致病力显著下降。气溶素是一种成孔毒素，具有溶血性、肠毒性和细胞毒性，其可在易感细胞的细胞膜上形成七聚体，从而导致细胞内容物外流而导致死亡。因此，气溶素成为研究抗嗜水气单胞菌感染药物的新靶标。

发明内容

本发明的目的在于提供了甘草查尔酮A在抗水产养殖动物嗜水气单胞菌感染中的应用，甘草查尔酮A对嗜水气单胞菌的生长几乎没有抑制作用，但能直接抑制嗜水气单胞菌气溶素的活性和细胞毒性，提高斑点叉尾鮰嗜水气单胞菌感染模型的存活率。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

甘草查尔酮A在抗水产养殖动物嗜水气单胞菌感染中的应用：经试验验证，甘草查尔酮A对嗜水气单胞菌的最小抑菌浓度大于256μg/mL，在本试验浓度下对嗜水气单胞菌的生长没有任何影响，但其能剂量依赖性的抑制气溶素的溶血活性，当甘草查尔酮A浓度超过0.5μg/mL以后在统计学上具有显著性。进一步实验研究发现，1μg/mL及以上浓度的甘草查尔酮A可显著抑制气溶素介导的A549细胞的细胞损伤，提示其对嗜水气单胞菌感染具有保护作用。另外，建立了斑点叉尾鮰嗜水气单胞菌感染模型，结果发现口灌25mg/kg剂量的甘草查尔酮A，每12h使用一次，连续3天，可显著提高感染动物的存活率，其存活率可达到70％，而阳性对照组全部死亡。通过以上研究表明，甘草查尔酮A可作为一种渔药用于防治水产养殖动物的嗜水气单胞菌感染。

甘草查尔酮A是一种来源于药用植物甘草的天然化合物，对动物和人没有毒副作用，可广泛用于制备抗水产养殖动物嗜水气单胞菌感染的药物。

与现有技术相比，本发明具有以下优点及有益效果：甘草查尔酮A抗感染作用并非直接抑制病原菌的生长，因此不会对病原菌造成选择性压力，不易产生耐药性，此外由于该药的作用非抑菌，因此对耐药菌仍有较好的治疗作用；甘草查尔酮A为天然化合物，对动物、人和生态环境均无毒性作用，药物残留风险较低。

附图说明

图1为甘草查尔酮A与嗜水气单胞菌168菌株共培养的生长曲线。

图2为甘草查尔酮A对嗜水气单胞菌培养物上清液溶血活性的影响。

图3为甘草查尔酮A对纯化气溶素溶血活性的影响。

图4为甘草查尔酮A对气溶素诱导的A549细胞损伤的影响。

具体实施方式