[发明专利]一种海内氏芽孢杆菌A87、菌剂及应用

说明书

本申请公开了一种海内氏芽孢杆菌A87、菌剂及应用。海内氏芽孢杆菌A87于2021年04月19日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为：GDMCC No:61610。本申请的海内氏芽孢杆菌A87是一株高产生物表面活性剂的菌株，菌株发酵及制备生物表面活性剂的方法简单易行，制备的生物表面活性剂及菌剂的环境适应性好，能保持较高的表界面活力和乳化降粘能力，具有高效的原油去除能力，可满足环境修复领域的工程需求。

技术领域

本申请涉及微生物领域，尤其涉及一种海内氏芽孢杆菌A87、菌剂及应用。

背景技术

随着经济的发展，人类对能源的需求也在不断扩大，石油是最重要的能源之一，被成为“工业的血液”。近些年来各国都加快了对油气资源的开发利用，从沙漠到海洋、从无人区到人口稠密区，越来越多的油气井出现在世界各地。随之土壤污染问题日益突出，石油对土壤的污染危害大，潜伏期长，涉及面广，有研究者将其比喻为“化学定时炸弹”，已经成为不容忽视的环境问题。

石油主要是由烃类化合物组成的一种复杂化合物，其组成复杂，含有致畸、致癌、致突变的物质(如卤代烃、苯系物、苯胺类、菲、苯并[a]芘等）。土壤作为人类、动植物和微生物赖以生存的重要环境基础，是自然界物质和能量参与转化、迁移和积累等循环过程的重要场所，土壤安全事关人类食品安全。石油一旦进入土壤，将对人类健康和生态环境造成严重危害。根据已公布的环境保护部和国土资源部发布的《全国土壤污染状况调查公告》显示，我国土壤总超标率高达16.1%。其中，有机类污染物，尤其是石油污染物已成为导致土壤安全问题的重要因素之一。据报道在我国，勘探和开发的油气田有400多个，覆盖面积达3.2×105km2，其中约4.8×106hm2的土壤受到不同程度的污染，部分油田周边土壤中的总石油烃（TPH)质量分数已经远远超过临界值500mg/kg，对人居安全和生态环境造成了严重的威胁。由此可见，石油污染土壤形势严峻，修复工作迫在眉睫。

发明内容

本申请提供一种海内氏芽孢杆菌A87、菌剂及应用，能够用于石油污染土壤处理。

本申请采用了下列技术方案：

第一方面，本申请提供了一种海内氏芽孢杆菌A87，于2021年04月19日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为：GDMCC No:61610。

第二方面，本申请提供了一种生物表面活性剂的制备方法，包括如下步骤：将上述的海内氏芽孢杆菌A87接种于NB固体培养基进行培养，得到单菌落，然后将单菌落接种于种子培养基进行第一次振荡培养，得到种子液，接着将种子液接种于发酵培养基进行第二次振荡培养，离心，得到发酵液。将发酵液干燥，得到样品，向样品加入无水乙醇后进行振荡提取，离心，保留上清液，挥发无水乙醇，得到生物表面活性剂。

进一步地，培养的条件为：在30℃培养1d。第一次振荡培养的条件为：在30℃、150rpm下振荡培养2d。第二次振荡培养的条件为：种子液与发酵培养基的体积比为1:20，在30℃、150rpm下振荡培养2d。

进一步地，干燥为冻干或烘干，冻干的条件为：将发酵液在-80℃冷冻，冻结后在-51℃抽真空进行冻干。振荡提取的条件为：温度为30℃，转速为180rpm，时间为24h。

第三方面，本申请提供了一种菌剂，包括上述的海内氏芽孢杆菌A87的培养物。

进一步地，菌剂还包括枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌，其中，海内氏芽孢杆菌A87的培养物的质量占比为50%，枯草芽孢杆菌的质量占比为25%，解淀粉芽孢杆菌的质量占比为25%。

第四方面，本申请提供了一种上述的海内氏芽孢杆菌A87、上述的制备方法制得的生物表面活性剂或上述的菌剂在排油和/或除油中的应用。

第五方面，本申请提供了一种上述的海内氏芽孢杆菌A87、上述的制备方法制得的生物表面活性剂或上述的菌剂在石油污染土壤处理中的应用。