[发明专利]一种用于检测FLT3基因突变的引物、探针及试剂盒有效
| 申请号： | 202111041056.8 | 申请日： | 2021-09-07 |
| 公开（公告）号： | CN113502332B | 公开（公告）日： | 2021-12-17 |
| 发明（设计）人： | 罗景燕;李静芳;许少飞;赖炳权 | 申请（专利权）人： | 广东永诺医疗科技有限公司;广州永诺生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6886 | 分类号： | C12Q1/6886;C12Q1/6851;C12N15/11 |
| 代理公司： | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人： | 颜希文;郝传鑫 |
| 地址： | 511500 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 检测 flt3 基因突变 引物 探针 试剂盒 | ||
1.一种FLT3基因突变的Drop-off数字PCR检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括引物对、特异性探针和内参探针；所述引物对的序列如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示；所述特异性探针的序列如SEQ ID NO:3所示；所述内参探针的序列如SEQ ID NO:4所示；所述特异性探针的5’端标记FAM，3’端标记BHQ1；所述内参探针的5’端标记VIC，3’端标记BHQ1。
2.根据权利要求1所述的FLT3基因突变的Drop-off数字PCR检测试剂盒，其特征在于，包括FLT3-TKD检测混合液、对照品和PCR反应预混液；所述FLT3-TKD检测混合液包括权利要求1所述的引物和探针；所述PCR反应预混液包括缓冲液、dNTPs、taq酶和UDG酶。
3.根据权利要求2所述的FLT3基因突变的Drop-off数字PCR检测试剂盒，其特征在于，所述引物在FLT3-TKD检测混合液中的浓度为900nM，所述探针在FLT3-TKD检测混合液中的浓度为250nM。
4.根据权利要求2所述的FLT3基因突变的Drop-off数字PCR检测试剂盒，其特征在于，所述对照品包括FLT3 D835弱阳性对照品、FLT3 I836del弱阳性对照品和空白对照品；所述FLT3 D835弱阳性对照品为FLT3 D835突变重组质粒和FLT3野生型质粒混合而成；所述FLT3I836del弱阳性对照品为FLT3 I836突变重组质粒和FLT3野生型质粒混合而成；所述空白对照品为无核酶水；所述FLT3 D835弱阳性对照品为突变型FLT3 D835质粒溶液用FLT3野生型质粒溶液稀释10倍配制而成；所述FLT3 I836del弱阳性对照品为突变型FLT3 I836del质粒溶液用FLT3野生型质粒溶液稀释10倍配制而成。
5.根据权利要求4所述的FLT3基因突变的Drop-off数字PCR检测试剂盒，其特征在于，所述FLT3野生型质粒的核苷酸序列为SEQ ID NO:5；所述FLT3 D835突变重组质粒的核苷酸序列为SEQ ID NO:6；所述FLT3 I836突变重组质粒的核苷酸序列为SEQ ID NO:7。
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