[发明专利]一种海洋真菌杂色曲霉M-7-SW9、混源萜类化合物及其提取方法和应用

说明书

本发明提供了一种海洋真菌杂色曲霉M‑7‑SW9、混源萜类化合物及其提取方法和应用，涉及微生物医药技术领域。本发明提供的海洋真菌杂色曲霉(Aspergillus versicolor)M‑7‑SW9保藏编号为CCTCC NO：M 2021454。本发明提供的海洋真菌杂色曲霉M‑7‑SW9中能够提取出具有式I所示结构的混源萜类化合物，所述混源萜类化合物对于迟缓爱德华氏菌和哈氏弧菌的最低抑菌浓度均为1.0μg/mL，抗迟缓爱德华氏菌和哈氏弧菌活性高于氯霉素；为开发海洋生物源天然药物，解决水产养殖过程中的细菌性病害防治问题提供了新的思路。

技术领域

本发明属于微生物医药技术领域，具体涉及一种海洋真菌杂色曲霉M-7-SW9、混源萜类化合物及其提取方法和应用。

背景技术

水产养殖业细菌性病害的威胁是世界性的，几乎侵害所有的水产养殖动物，不仅造成重大的经济损失，也为水产品质量安全埋下了隐患。据水产养殖动物病害监测结果显示，近年来水产养殖病害种类高达200余种，其中细菌性疾病占48％以上。在细菌性水产动物疾病中，由弧菌属细菌引起的弧菌病是最主要的细菌性疾病，该病发生范围广、致死率高，且能够引起人畜共患，是水产养殖病害防治领域的主要难题之一。

近年来，随着水产养殖规模的发展和水产养殖过程中传统型抗生素的大量使用，水产养殖动物病原菌和养殖环境中细菌的多重耐药现象日趋普遍，并且化学合成药物的大量使用对水体和土壤带来了严重的污染，对生物和人类健康都造成了直接和潜在的危害。

与水产养殖业中使用的传统抗生素和化学合成药物相比，海洋生物源天然药物具有安全性高、针对性强、活性显著、对环境友好且能够解决目前大部分水产病害细菌对传统抗生素的耐药性问题，为解决目前水产养殖过程中的细菌性病害防治问题提供了新的思路。例如，中国专利CN201810906911.9公开了一种海洋真菌温特曲霉来源的降二萜类化合物，化合物1和化合物2，其结构式如下：

然而，上述化合物对于迟缓爱德华氏菌和哈氏弧菌的最低抑制浓度(MIC值)均为8.0μg/mL，对水产病害细菌的抑制活性不够高。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种海洋真菌杂色曲霉M-7-SW9、混源萜类化合物及其提取方法和应用，从所述海洋真菌杂色曲霉M-7-SW9中提取出来的混源萜类化合物对水产病害细菌，尤其是对迟缓爱德华氏菌和哈氏弧菌的抑制活性高。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种海洋真菌杂色曲霉(Aspergillus versicolor)M-7-SW9，所述海洋真菌杂色曲霉M-7-SW9的保藏编号为CCTCC NO：M 2021454。

本发明提供了一种混源萜类化合物，具有式I所示的结构：

本发明提供了上述技术方案所述混源萜类化合物的提取方法，包括以下步骤：

(1)将权利要求1所述的海洋真菌杂色曲霉M-7-SW9在PDB液体培养基上进行发酵培养，采用极性有机溶剂对得到的发酵产物进行提取，得到发酵粗提物；

(2)将所述发酵粗提物进行正相硅胶柱层析分离，得到洗脱组分；所述正相硅胶柱层析分离的洗脱方式为梯度洗脱，所述梯度洗脱采用的洗脱剂为低极性溶剂-高极性溶剂；所述低极性溶剂-高极性溶剂中低极性溶剂和高极性溶剂的体积比为50～0：1；

(3)将所述洗脱组分进行反相硅胶柱层析分离，得到粗产物；所述反相硅胶柱层析分离的洗脱方式为梯度洗脱，所述梯度洗脱采用的洗脱剂为水-醇溶剂，所述水-醇溶剂中水和醇的体积比为4～0：1；

(4)将所述粗产物进行纯化，得到具有式I所示结构的混源萜类化合物；所述纯化包括依次进行的凝胶柱层析和薄层层析，或，高效液相色谱纯化；