[发明专利]一种用于检测人integrin β4 IgG抗体的ELISA试剂盒及其应用

说明书

本发明公开了一种用于检测人integrinβ4IgG抗体的ELISA试剂盒及其应用。所述的试剂盒中含有integrinβ4微孔条带，所述的integrinβ4微孔条带中分别包被有SEQ ID NO.1‑39所示的多肽。优选的，所述的试剂盒中还含有标准血清1和2、酶标抗体、稀释液、反应缓冲液、清洗缓冲液、酶基质液以及终止液。本发明利用多个抗原多肽来替代长片段的完整蛋白作为ELISA的包被蛋白，在充分保障了抗体识别的抗原表位的同时，节约了大量的成本，且相对于重组蛋白而言，敏感性会更高。本发明利用ELISA方法检测人integrinβ4IgG抗体，相对于现有的免疫印迹法，更容易应用于临床对粘膜类天疱疮的诊断。

技术领域

本发明涉及一种ELISA试剂盒及其应用，特别涉及一种用于检测人integrin β4IgG抗体的ELISA试剂盒及其应用。本发明属于医药技术领域。

背景技术

人粘膜类天疱疮(mucous membrane pemphigoid)是一类主要影响老年人的皮肤自身免疫性水疱病，主要表现为口腔粘膜、眼粘膜及其它粘膜和皮肤的损伤。单纯依靠临床表现无法进行诊断，目前必须要依靠患者血清中自身抗体的检出才能确诊。粘膜类天疱疮的主要自身抗原包括BP180、laminin-332和integrin α6β4。因此，检测这些自身抗原对应的自身抗体，成为粘膜类天疱疮诊断的必要条件。

目前针对血清中BP180、laminin-332自身抗体的检测已经有商品化的ELISA试剂盒或者报道的ELISA方法可以应用。但是针对血清中integrin β4自身抗体的ELISA方法尚未见报道。现有的检测人integrin β4的IgG自身抗体的方法主要是免疫印迹法，使用不同的抗原资源，包括HD-rich fraction，integrin β4胞内区重组蛋白，integrinα6β4胞外区重组蛋白。其中HD-rich fraction是使用皮肤角化上皮细胞系(DJM-1或A431)经过长时间培养后获得的细胞基底膜蛋白混合物(1.Li X,Qian H,Sogame R,Hirako Y,Tsuruta D,Ishii N,Koga H,Tsuchisaka A,Jin Z,Tsubota K,Fukumoto A,Sotozono C,KinoshitaS,Hashimoto T.Integrinβ4is amajor target antigen in pure ocular mucousmembrane pemphigoid.Eur J Dermatol.2016；26(3):247-53.(IF＝2.4))。然而免疫印迹的方法，操作复杂，不适宜应用于临床检测，从而限制了它的应用。HD-rich fraction这个资源获得比较耗时(18天)，而且需要用价格比较贵的细胞培养液进行培养，成本很高；HD-rich fraction、integrin β4胞内区重组蛋白和integrin α6β4胞外区重组蛋白的成本费用也都较高。

为此，本发明提供了一种integrin β4 IgG抗体的ELISA试剂盒，能够进行粘膜类天疱疮患者血清中integrin β4 IgG自身抗体的检测，从而将能够促进粘膜类天疱疮的诊断问题的进一步解决。

发明内容

本发明的目的在于提供一种用于检测人integrin β4 IgG抗体的ELISA试剂盒及其应用。

为了达到上述目的，本发明采用了以下技术手段：

本发明的一种用于检测人integrin β4 IgG抗体的ELISA试剂盒，所述的试剂盒中含有integrin β4微孔条带，所述的integrin β4微孔条带中分别包被有SEQ ID NO.1-39所示的多肽。

其中，优选的，所述的试剂盒中还含有标准血清1和2、酶标抗体、稀释液、反应缓冲液、清洗缓冲液、酶基质液以及终止液。