[发明专利]栀子黄脂质体的制备方法

说明书

本发明栀子黄脂质体的制备方法，以栀子黄色素为研究对象，采用乙醇注入法制备栀子黄脂质体，以栀子黄包封率为指标，通过响应面法优化栀子黄脂质体制备的反应参数，并通过Zeta电位与平均粒径、傅里叶红外光谱和透射电子显微镜等技术对其结构与形态进行表征。采用壳聚糖对栀子黄脂质体进行表面修饰，通过分析经紫外光照射、加热和体外模拟消化等处理后的脂质体中Zeta电位、平均粒径及释放率等指标的变化，研究壳聚糖修饰栀子黄脂质体的稳定性。紫外光照射、加热和体外模拟消化试验结果表明，壳聚糖修饰脂质体的稳定性明显高于未修饰脂质体。本发明可为水溶性类胡萝卜素脂质体的制备及其应用提供一定的理论基础。

技术领域

本发明属于药物制备技术领域，具体涉及一种栀子黄脂质体的制备方法。

背景技术

栀子黄色素是一种重要的水溶性天然色素，其中含有α-藏花素、藏花酸、绿原酸及黄酮等有效成分，主要提取自茜草科植物的果实中。该色素颜色鲜艳、安全无毒，具有良好的药用价值，如保肝利胆、活血化瘀、抗神经衰弱及抑制肿瘤细胞增殖等。因此，栀子黄色素广泛应用于食品、医药、工业和化妆品等重要领域。然而，栀子黄色素水溶液对光照、温度、酸碱性等较为敏感，稳定性差，从而限制了其在某些领域的应用。

脂质体是一种具有磷脂双分子层结构、内部包含水相的闭合囊泡，具有高细胞亲和性、组织相容性和低免疫原性等特点，在医药、农业、化工等领域具有重要的应用价值。通常，脂质体用于包封抗氧化剂、食品添加剂、矿物质、抑菌剂等活性功能成分，可有效提高被包裹物质的稳定性。然而，研究发现脂质体在胃肠道中的酶、胆盐等作用下易乳化、水解，从而降低了包封物质的生物利用率。此外，在贮藏过程中，脂质体易发生氧化、聚集，从而导致包封物质泄漏。通过物理化学方法将多糖、蛋白等物质修饰于脂质体表面是增强脂质体稳定性和提高包封物质可控性的主要方法。焦岩等制备了多聚赖氨酸修饰的叶黄素纳米脂质体并评价了其包封效果和胃肠消化释放性能。结果表明该脂质体可有效增强对脂溶性叶黄素的包封效果和胃肠消化释放性能。

为了解决类胡萝卜素生物利用率低且在加工贮藏过程中稳定性差等问题，国内外学者开展了大量研究。脂质体、微胶囊包埋及纳米乳液制备技术是目前最常用的三种色素稳态化技术。其中，微胶囊制备所需设备复杂、生产成本高，而纳米乳液制备较多使用非食品级的溶液。因此，脂质体多用于食品级色素的包封。脂质体可有效提高色素的稳定性与生物利用率。栀子黄是为数不多的水溶性类胡萝卜素。目前，对于水溶液类胡萝卜脂质体制备的研究报道较少。

近年来，采用脂质体制备技术提高类胡萝卜的稳定性和生物利用率已成为研究热点。但是，脂质体本身仍存在黏附力差、易水解，在加热、强光及胃肠消化环境下稳定性差等问题，一定程度上限制了类胡萝卜素脂质体作为功能性成分及营养物质在食品与药品领域的应用。

壳聚糖是一种在自然界大量存在的阳离子聚合物，主要通过甲壳素脱乙酰化得到，为白色或淡黄色固体粉末，具有良好的生物可降解性和生物相容性。Tian等制备了壳聚糖修饰的类胡萝卜素脂质体并研究其体外释放行为，结果表明壳聚糖修饰脂质体在功能食品方面具有更高的应用价值。但由于不同的脂质体具有各自的特点，虽然目前有不同的脂质体的制备方法，但是对于栀子黄脂质体的制备没有过多的参考价值。

发明内容

针对现有技术中存在的问题，本发明设计的目的在于提供一种栀子黄脂质体的制备方法，以期给栀子黄脂质体的制备提供指导价值。

本发明通过以下技术方案加以解决：

所述的栀子黄脂质体的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1）取蛋黄卵磷脂和胆固醇溶于溶液中，使其充分溶解；其中，蛋黄卵磷脂与胆固醇的质量比4：1-6：1，所述溶液为二氯甲烷和乙醇的混合溶液，二氯甲烷与乙醇的体积比为1:1-3:1；

2）将步骤1）的混合溶液于45-55℃的温度条件下边搅拌边滴加至含栀子黄的磷酸盐缓存液中，滴加完成后，继续恒温搅拌30min，获得脂质体溶液；所述蛋黄卵磷脂与栀子黄的质量比为20-40:1；