[发明专利]一种间充质干细胞制备抗衰去皱化妆品的方法

权利要求书

1.一种间充质干细胞制备抗衰去皱化妆品的方法，其特征在于，其包括以下步骤：

获取间充质干细胞原代细胞；

将间充质干细胞原代细胞进行传代培养，得到间充质干细胞；

收集第3代以后的间充质干细胞的上清液，加入六胜肽、寡肽-1，寡肽-3，胶原蛋白、玻尿酸、绿藻提取物、绵毛多管藻提取物、凝结多糖和水，得到混合溶液，将混合溶液经冻干工艺后，得到抗衰去皱化妆品。

2.根据权利要求1所述的一种间充质干细胞制备抗衰去皱化妆品的方法，其特征在于，所述间充质干细胞原代细胞的来源包括人或动物的骨髓、脐带、胎盘、脂肪和牙齿中的一种。

3.根据权利要求2所述的一种间充质干细胞制备抗衰去皱化妆品的方法，其特征在于，所述间充质干细胞原代细胞的来源为胎盘。

4.根据权利要求1所述的一种间充质干细胞制备抗衰去皱化妆品的方法，其特征在于，所述获取间充质干细胞原代细胞的步骤具体为：将样本细胞经清洗和首次离心后按照体积比为1：(1～1.5)加入细胞分离液，再经梯度离心获取单个核细胞层，再次离心后将沉淀进行接种培养，每隔48～72h进行换液，去除非贴壁细胞，得到间充质干细胞。

5.根据权利要求4所述的一种间充质干细胞制备抗衰去皱化妆品的方法，其特征在于，所述清洗具体为将样本细胞重悬在完全培养基中，用吸管反复吹打制得单细胞悬液，首次离心的转速为400～600rpm，离心时间为20～40min，所述细胞分离液采用比重为1.07～1.09g/ml的Percoll细胞分离液，所述梯度离心具体为先在1000～1100rpm离心10～15min，然后在1150～1200rpm离心10～15min，最后在1500～1600rpm离心15～20min。

6.根据权利要求1所述的一种间充质干细胞制备抗衰去皱化妆品的方法，其特征在于，所述传代培养具体为：当细胞的融合度达到80～90％时，加入胰蛋白酶-EDTA溶液进行消化，消化结束后采用胎牛血清进行终止，然后离心后弃去上清液，用完全培养基重悬，按照1：(3～5)进行传代培养。

7.根据权利要求6所述的一种间充质干细胞制备抗衰去皱化妆品的方法，其特征在于，所述胰蛋白酶-EDTA溶液中胰蛋白酶的浓度为0.2～0.3mg/ml，所述EDTA的浓度为0.02～0.1mg/ml。

8.根据权利要求5或6所述的一种间充质干细胞制备抗衰去皱化妆品的方法，其特征在于，所述培养的条件为37℃、4～6％CO₂饱和湿度。

9.根据权利要求1所述的一种间充质干细胞制备抗衰去皱化妆品的方法，其特征在于，所述混合溶液中各原料的重量份为：30～40份间充质干细胞液、1～3份六胜肽、0.5～1份寡肽-1、0.5～1份寡肽-3、3～5份胶原蛋白、3～5份玻尿酸、1～3份绿藻提取物、0.5～2份绵毛多管藻提取物、2～5份凝结多糖和35～50份水。

10.根据权利要求1所述的一种间充质干细胞制备抗衰去皱化妆品的方法，其特征在于，所述冻干工艺具体为：先将混合液在-50～-40℃下预冻10～12h，然后在-60～-50℃下预冻2～4h，最后在0.2～0.6Pa、-48～-42℃下真空冷冻20～40h。