[发明专利]一组用于检测稻曲病菌交配型的引物组、试剂或试剂盒及其应用和方法

说明书

本发明涉及植物保护技术领域，特别是涉及一组用于检测稻曲病菌交配型的引物组、试剂或试剂盒及其应用和方法。本发明提供了一组用于检测稻曲病菌交配型的引物组，所述引物组包括第一引物组和第二引物组；所述第一引物组包括核苷酸序列如SEQ ID NO.1～4所示的引物；所述第二引物组包括核苷酸序列如SEQ ID NO.5～8所示的引物。利用本发明所述引物组能够快速检测稻曲病菌交配型基因的分子生物学方法，具有灵敏度高、特异性强等优势。

技术领域

本发明涉及植物保护技术领域，特别是涉及一组用于检测稻曲病菌交配型的引物组、试剂或试剂盒及其应用和方法。

背景技术

稻曲病由Villosiclava virens(无性态Ustilaginoidea virens(Cooke)Takahashi)侵染水稻穗部引起，是我国水稻生产上的重大病害。近年来，稻曲病在全球各水稻产区发生越来越严重，在我国也呈现不断加重的趋势，已经从次要病害上升为主要病害，严重制约了我国水稻安全生产。

稻曲病菌以菌核和厚垣孢子越冬，菌核萌发产生的子囊孢子(有性生殖产生)和厚垣孢子(无性繁殖产生)均能产生次生分生孢子，均可作为稻曲病菌的侵染源。其中菌核抗逆性极强，据调查显示我国浙江省部分地区田间菌核量高达225万个/hm²。菌核萌发产生的子囊孢子更高达65亿个/hm²，覆盖水稻整个孕穗期。可见有性生殖在稻曲病流行中具有重要地位。稻曲病菌有性生殖为二极性异宗配合，由一对决定其交配型的基因位点MAT1-1和MAT1-2组成。MAT1-1位点含有3个基因：MAT1-1-1、MAT1-1-2和MAT1-1-3；MAT1-2位点含有2个基因：MAT1-2-1和MAT1-2-8。

对稻曲病菌交配型进行监测能够及时预测田间稻曲病菌有性生殖发生情况，为稻曲病菌的流行预警提供重要的参考价值。

近年来，相继有研究者用常规PCR或者多重PCR对稻曲病菌的交配型基因进行了扩增。这些方法相对传统，不仅需要昂贵的PCR仪，且存在灵敏度低、特异性低等缺点。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供了一组用于检测稻曲病菌交配型的引物组、试剂或试剂盒及其应用和方法。利用本发明所述引物组能够快速检测稻曲病菌交配型基因的分子生物学方法，具有灵敏度高、特异性强等优势。

为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

本发明提供了一组用于检测稻曲病菌交配型的引物组，所述引物组包括第一引物组和第二引物组；

所述第一引物组包括MAT1-1-2外引物组和MAT1-1-2内引物组；所述MAT1-1-2外引物组包括MAT1-1-2-F3和MAT1-1-2-B3；所述MAT1-1-2-F3的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述MAT1-1-2-B3的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；

所述MAT1-1-2内引物组包括MAT1-1-2-FIP和MAT1-1-2-BIP；所述MAT1-1-2-FIP的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；所述MAT1-1-2-BIP的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示；

所述第二引物组包括MAT1-2-1外引物组和MAT1-2-1内引物组；所述MAT1-2-1外引物组包括MAT1-2-1-F3和MAT1-2-1-B3；所述MAT1-2-1-F3的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示；所述MAT1-2-1-B3的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示；

所述MAT1-2-1内引物组包括MAT1-2-1-FIP和MAT1-2-1-BIP；所述MAT1-2-1-FIP的核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示；所述MAT1-2-1-BIP的核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示。

本发明提供了上述的引物组在制备检测或辅助检测稻曲病菌交配型的工具中的应用。