[发明专利]一种溃疡性结肠炎动物模型的构建方法

说明书

本发明涉及实验动物模型领域，特别涉及一种溃疡性结肠炎动物模型的构建方法。该构建方法具体为：试验动物空腹一段时间后，每日给予特定比例的柠檬酸杆菌和葡聚糖硫酸钠，给药3～5天后，得到溃疡性结肠炎动物模型。本发明通过柠檬酸杆菌致使小鼠免疫功能下降再联合使用葡聚糖硫酸钠致炎的新颖溃疡性结肠炎动物模型构建方法，可解决目前溃疡性结肠炎动物模型中存在的容易自愈、建模周期长、费用高及成功率低的问题。

技术领域

本发明涉及实验动物模型领域，特别涉及一种溃疡性结肠炎动物模型的构建方法。

背景技术

溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis，UC)，是以结直肠黏膜连续性、弥漫性炎症改变为特点的慢性非特异性肠道炎性疾病，其全球发病率正在上升。UC病变局限于大肠黏膜及黏膜下层，临床表现为腹泻、黏液脓血便、腹痛，病程迁延，不同患者的疾病严重程度和轻重不等，常反复发作。本病可见于任何年龄。在罕见的严重炎症病例中，特别是那些在诊断前长期未经治疗的UC患者，会出现体重减轻、发烧或穿孔的症状。在多达25％的患者中，术外表现可能早于胃肠道症状的出现。因UC治愈难度大，发病率呈逐年升高趋势，且有癌变倾向，已被WHO列为现代难治性疾病，被称为“绿色癌症”。

UC的发病机制是多因素的，且病因至今尚未完全明确，其发病机制主要包括遗传因素、上皮障碍缺陷、免疫反应失调和环境因素、心理因素等。溃疡性结肠炎患者从直肠开始有黏膜炎症，可以持续延伸到结肠的近端。

用动物模型可以复制某些不能直接在人类身上进行观察和研究的疾病，它是医学研究的重要手段，所以医学研究常使用动物模型作为临床和理论假说的实验基础，而一个理想的动物模型也是医学实验成功与否的关键因素。由于溃疡性结肠炎治愈难度大，易复发，且发病率和患病率逐年增加，因此，建立理想的UC动物模型对于深入研究UC发病机制、病变规律及用药治疗方案具有重要意义。然而到目前为止，还没有一个与人类UC发病机制及临床表现完全相符的实验动物模型，需根据不同研究目的选择不同的动物模型。

目前，建立溃疡性结肠炎动物模型的方法主要有以下几种：

1、化学刺激法

许多疾病模型都可以利用化学方法建立。

①乙酸(acetic acid，AA)

此模型通过乙酸的刺激作用使结肠上皮细胞凋亡，破坏黏膜屏障，引发炎症介质的大量表达，诱导炎症细胞的浸润。乙酸灌肠法建模后也在短期内表现出与人类UC相似的病变，如上皮细胞坏死，黏膜细胞高度水肿，中性粒细胞浸润以及出血等，而乙酸诱导UC模型中这样的症状通过低分子量肝素直肠栓剂的应用能够得到改善，为UC的治疗提供了新思路；孙茂庆等对新西兰兔以乙酸局部刺激也较好地复制了UC模型，并且他们通过对不同浓度(5％乙酸、8％乙酸和10％乙酸)的比较，发现5％浓度能够保证实验动物死亡率较低而模型复制程度较好，而以兔作为UC模型无论是在操作简便性还是在给药途径方面都比鼠类更优越。乙酸的来源广泛方便，故而成本低廉，使用直接灌肠的方法也能够被大多数实验人员接受并熟练掌握，所以应用较广。但是就目前所知临床上罕见由直接黏膜损伤所致UC，而这与AA所带来的化学刺激不相符合，故而在模拟人类UC的发病机制上值得权衡。另外，短期急性发作之后缺乏与人类UC相似的慢性复发的过程，而且乙酸刺激后容易发生自愈导致无法进行长期疗效的观测，这也是此方法的一大缺点。

②葡聚糖硫酸钠(dextran sulphate sodium，DSS)

自从1985年报道日本学者首次采用DSS制备出溃性结肠炎模型后，已有大量数据证明DSS结肠炎模型的病因、临床症状、病理改变及治疗应答均与人类溃疡性结肠炎相似。因此，DSS结肠炎模型对于研究UC病因、发病机制起到关键作用，成为了一种很重要治疗手段，也是目前应用最为广泛的UC模型之一。