[发明专利]一株肺炎克雷伯菌KP21株及其应用

说明书

本发明属于生物技术领域，具体涉及一株肺炎克雷伯菌KP21株及其应用。本发明从得肺炎的驴中分离出一株肺炎克雷伯菌，然后经过培养后获得中等大小、边缘整齐、光滑湿润、圆形凸起的菌落；将其进行小鼠侵染实验，与该株肺炎克雷伯菌对驴造成的肺炎症状一致；同时用其制备该菌的灭活菌苗，对于有效预防当地流行菌株引起的驴肺炎以及加强病原生化和分子鉴定等研究和可能应用均有重要价值。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一株肺炎克雷伯菌KP21株及其应用。

背景技术

肺炎克雷伯氏菌是肠杆菌科克雷氏菌属中非常重要的一类革兰氏阴性杆菌，同时也是人畜共患的病原微生物，在自然界中分布广泛，在人和动物体内主要分布于呼吸道、肠道及泌尿生殖道，是正常机体微生物群的组成部分，但在免疫功能低下等情况下，可成为致病菌引起机会性感染。

肺炎克雷伯菌属包括肺炎克雷伯肺炎亚种、臭鼻亚种及鼻硬结亚种3 个亚种，其中肺炎克雷伯肺炎亚种分布最为广泛，是引发多种动物及人肺炎、腹泻、泌尿道、胆道感染、败血症和化脓性脑膜炎等严重疾病的病原菌之一。肺炎克雷伯菌可能对养驴业具有潜在威胁，应引起重视。国内关于驴源肺炎克雷伯菌报道较少。

驴本身对常见的疾病有较强的耐受力，尤其是在传统的散养条件下，由于养殖的数量少而且分散，驴出现传染病的概率低。然而在规模化养驴场，由于群体养殖密度的增加，使驴传染病发病几率增加，驴疫病一旦爆发和流行将会给驴产业造成公共卫生安全危机，同时也将给阿胶、驴肉、驴奶等产业带来严重的食品安全威胁和经济损失，因此，在集约化养殖、流动频繁以及动物产品交易国际化背景下，做好疫病防控十分必要。虽然肺炎克雷伯菌细菌暂时没有对养驴业造成影响，但为了促进养驴业的快速发展，尽快净化本病和控制该菌的发生和流行，预防阻断肺炎克雷伯菌对驴的感染，必须分离当地的驴肺炎克雷伯流行株，加强病原生化和分子鉴定等研究和可能应用，实现对当地导致驴肺炎的有效防治。

发明内容

为了预防及阻断肺炎克雷伯菌对驴的感染，同时为了促进养驴业的快速发展，本发明从得肺炎的驴中分离出一株肺炎克雷伯菌，然后经过培养后获得中等大小、边缘整齐、光滑湿润、圆形凸起的菌落；将其进行小鼠侵染实验，与该株肺炎克雷伯菌对驴造成的肺炎症状一致；同时用其制备该菌的灭活菌苗，对于有效预防当地流行菌株引起的驴肺炎以及加强病原生化和分子鉴定等研究和可能应用均有重要价值。

本发明的技术方案如下：

一株肺炎克雷伯菌株 Klebsiella pneumoniaeKP21，所述的肺炎克雷伯菌株 Klebsiella pneumoniaeKP21的微生物保藏号为CGMCC22865，保藏日期：2021年07月09日，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。

所述的肺炎克雷伯菌株 Klebsiella pneumoniaeKP21来源于驴源；在营养琼脂培养基中培养，得到中等大小、边缘整齐、光滑湿润、圆形凸起的菌落；接种至营养肉汤的菌液中，利用革兰氏染色观察，得到革兰氏阴性、较短粗的杆菌。

所述的肺炎克雷伯菌株 Klebsiella pneumoniaeKP21的16S rDNA序列如SEQIDNo.1所示。

所述的16S rDNA的PCR扩增细菌16S rDNA的通用引物为：

F27序列如SEQID No.2所示：5′-AGAGTTGATCCTGGCTCAG-3′；

R1492序列如SEQID No.3所示：5′-AAGGAGGTGATCCAACCGCA-3′。