[发明专利]融合基因、融合蛋白及制备方法和牛支原体亚单位疫苗

权利要求书

1.一种融合基因，其特征在于，所述融合基因的核苷酸序列如第一序列所示，所述第一序列其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。

2.一种质粒载体，其特征在于，所述质粒载体包括：pUC质粒；以及插入该pUC质粒中的如权利要求1所述的融合基因。

3.根据权利要求2所述的质粒载体，其特征在于，所述pUC质粒选自pUC17质粒、pUC18质粒和pUC19质粒中的任意一种。

4.一种转移载体，其特征在于，所述转移载体包括：杆状病毒转移质粒；以及插入该杆状病毒转移质粒中的如权利要求1所述的融合基因。

5.根据权利要求4所述的转移载体，其特征在于，所述杆状病毒转移质粒选自pFastBac1、pVL1393和pFastBac dual中的任意一种。

6.一种重组质粒，其特征在于，所述重组质粒包括：杆状病毒载体Bacmid；以及插入该杆状病毒载体Bacmid中的如权利要求1所述的融合基因。

7.一种受转染细胞，其特征在于，所述受转染细胞由如权利要求6所述的重组质粒在转染体系的作用下转染宿主细胞而形成；

所述宿主细胞选自Sf9细胞、High Five细胞或Sf21细胞中的任意一种。

8.一种融合蛋白，其特征在于，由如权利要求7所述的受转染细胞表达融合基因而形成；所述融合基因的核苷酸序列如第一序列所示，所述第一序列，其核苷酸序列如SEQ IDNO：1所示。

9.一种融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白的氨基酸序列如第三序列所示，所述第三序列，其氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。

10.一种如权利要求8或9所述的融合蛋白的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

制备融合基因；所述融合基因的核苷酸序列如第一序列所示，所述第一序列的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；

将所述融合基因克隆入杆状病毒转移质粒中，得到转移载体；

采用所述转移载体转化DH10Bac菌株，筛选出重组菌株，抽提出含有所述融合基因的重组质粒，并转染宿主细胞，获得受转染细胞；

收集所述受转染细胞的细胞培养物，提纯后得到融合蛋白。

11.如权利要求8或9所述的融合蛋白在制备牛支原体的抗体中的应用。

12.一种亚单位疫苗，其特征在于，含有如权利要求8或9所述的融合蛋白和佐剂；

所述融合蛋白在所述亚单位疫苗中的浓度为100±10μg/ml；

所述佐剂选自MONTANIDE ISA 206VG、MONTANIDE ISA 201VG、MONTANIDE ISA 51VG、液体石蜡、角鲨烷、皂苷、植物油、细胞因子中的任意一种或者两种以上的组合。