[发明专利]一种具有抗肿瘤活性的化合物及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种抗肿瘤的化合物及其制备方法和应用。本发明公开的化合物为对映‑贝壳杉烷型二萜新化合物，鉴定为16β‑17‑hydroxy‑18‑nor‑ent‑kaurane‑4β‑ol，其分子式为Csubgt;19/subgt;Hsubgt;32/subgt;Osubgt;2/subgt;。本发明通过大量实验筛选，对番荔枝果皮的有效成分进行深入研究，通过渗漉提取、正相硅胶柱色谱分离得到具有显著抗癌活性的对映‑贝壳杉烷型二萜新化合物。本发明提供的制备工艺，设计合理，可操作性强，可以实现废弃番荔枝果皮的资源利用，具有重要的应用价值。

技术领域

本发明涉及中药提取分离方法和应用，具体涉及一种从番荔枝果皮中分离得到的具有抗肿瘤活性的对映-贝壳杉烷型二萜新化合物。

背景技术

肝癌是我国发病率最高的癌种，因其隐匿性高，发现时多已到达晚期，具有高死亡率的特点。介入疗法(局部化疗)是治疗中晚期肝癌的重要手段，但是化疗药的毒副作用严重危害了患者的健康，因此，挖掘具有抗肝癌活性的天然药物成为肝癌研究的重要方向。

热带著名水果番荔枝，又名释迦、佛头果，文献记载其可治疗恶疮肿痛。番荔枝种子作为广东省地方中药，广泛用于肿瘤的治疗，包括肝癌。前期研究发现，番荔枝果皮提取物具有很好的抗肝癌活性，其活性成分主要集中在小极性部位。

番荔枝果皮作为潜在抗肝癌药材，一直作为废弃物丢弃，为了使废弃物变废为宝，本发明对番荔枝果皮小极性成分进行分离，并筛选出其抗肝癌活性成分。

发明内容

发明目的：本发明的第一个目的在于从番荔枝果皮中分离得到一个新的对映-贝壳杉烷型二萜新化合物16β-17-hydroxy-18-nor-ent-kaurane-4β-ol，分子式为C₁₉H₃₂O₂,结构式为：

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本发明的第二个目的在于提供从番荔枝果皮提取分离新化合物16β-17-hydroxy-18-nor-ent-kaurane-4β-ol的制备方法，包括以下步骤：

(1)取风干的番荔枝果皮并粉碎成粗粉，润湿后转移至渗漉筒中，采用乙醇室温下渗漉提取，合并渗漉提取液，置于旋转蒸发器中，减压浓缩，得到浸膏；

(2)将乙醇浸膏用乙酸乙酯溶解后，以硅胶拌样成干燥细粉，采用硅胶湿法装柱，上样后，以石油醚-乙酸乙酯、乙酸乙酯-甲醇梯度洗脱，薄层分析展板检测合并相同流分，得到15个部位段，依次编号为F1～F15；

(3)取F5部位，经干法拌样后，装入硅胶柱并以石油醚：丙酮系统洗脱，再次分为5个段，分别为F5-1，F5-2，F5-3，F5-4和F5-5；将F5-1和F5-2合并，以石油醚-丙酮梯度洗脱后，得对映-贝壳杉烷型二萜新化合物。

作为优选方案，从番荔枝果皮提取分离新化合物16β-17-hydroxy-18-nor-ent-kaurane-4β-ol的制备方法，包括以下步骤：

(1)取风干的番荔枝果皮8kg并粉碎成粗粉，适当润湿后转移至渗漉筒中，采用10倍体积的95％EtOH室温下渗漉提取三次。合并提取液，于旋转蒸发器中减压浓缩提取液得到乙醇浸膏400g。

(2)将400g乙醇浸膏用乙酸乙酯溶解后，以400g硅胶(100-200目)拌样成干燥细粉，采用2kg硅胶(200-300目)湿法装柱，上样后，以石油醚-乙酸乙酯(1:0，50:1，25:1，10:1，5:1，2:1，1:1，1:2，1:5，0:1)、乙酸乙酯-甲醇(100:1，50:1，10:1，0:1)梯度洗脱，每1L作为一个流分，薄层分析展板检测合并相同流分，得到15个部位段，依次编号为F1～F15。