[发明专利]枯草芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌分泌的Ericin1a抗菌肽及其应用

说明书

本发明公开了一株枯草芽孢杆菌，其保藏编号为：CGMCC No.23153。枯草芽孢杆菌为经过诱变筛选获得的抗菌活性进一步得到增强的菌株，使之能在动物肠道内持续分泌表达抗菌肽，兼有益生菌和抗菌活性小肽的优点，并且无毒副作用，无抗生素残留，代替传统抗生素的使用，提升生命科学技术水平。本发明提供的Ericin1a抗菌肽可以代替抗生素用于制备预防细菌性疾病的抑菌剂，对减少抗生素的滥用起到重要作用。本发明公开了一种Ericin1a抗菌肽在制备针对革兰氏阴性细菌的抑菌剂中的应用。本发明公开了枯草芽孢杆菌在制备预防或防治革兰氏阴性细菌性传染病的禽畜饲料中的应用。本发明公开了一种禽畜饲料，所述禽畜饲料内添加有枯草芽孢杆菌。

技术领域

本发明涉及生物工程技术领域，特别涉及一种枯草芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌分泌的Ericin1a抗菌肽及其应用。

背景技术

抗生素的滥用是养殖业的一个非常严重的问题。不仅造成了抗生素在肉蛋奶中的残留，影响人们的身体健康，而且在过去的十年中，能耐受多种抗生素的超级细菌的迅速出现已成为全球关注的问题，这促使人们寻找用于畜禽养殖的的替代抗菌剂。由细菌，昆虫，两栖动物和哺乳动物以及化学合成产生的抗菌肽(AMP)，由于其天然的抗菌特性，无残留以及对微生物产生抗药性的倾向较低，因此是替代抗生素的新型抗菌剂的有力候选者。根据国外最新的研究进展，Y.Kaznessis,D'Silva,L.Dicks等英美的科学家成功地将表达抗菌型活性小肽的益生菌应用于实验动物和养殖，取得了良好的抗菌疗效，并通过长期观察，未见不良反应。一项韩国研究表明，在每日饲料中添加60mg/kg抗菌肽P5(AMP-P5)来替代抗生素，可以改善肉鸡的生长性能，营养吸收，肠道健康状况，并减少肉鸡的肠道和粪便中的大肠菌群。

抗菌肽是生物体内经诱导产生的一种具有抑菌活性的小分子多肽。些物种的昆虫、哺乳动物和微生物等都有产生抗菌活性小肽的能力，例如两栖动物蛙的皮肤中分离到的蛙皮素(Magainins)和昆虫天蚕幼虫分泌的天蚕素(cecropin AD)等。抗菌活性小肽是纯天然的肽，具有广谱抗菌活性，可以快速查杀靶标，使它迅速成为潜在的治疗药物。抗菌活性小肽的作用机制至今还没有完全弄清楚。目前研究显示，抗菌活性小肽是通过作用于细菌细胞膜而起作用的。天蚕素类抗菌活性小肽作用于细胞膜，插入磷脂膜形成跨膜的通道，破坏了膜的完整性，造成细胞内物质的泄漏，从而杀死细胞。但对其具体作用过程、是否存在特异性的膜受体、有无其它因子协同等问题尚不十分清楚，存在不同看法。不同抗菌活性小肽的作用机制可能不一样，尚有待进一步研究。抗菌活性小肽具有广谱抗菌活性，作用范围包括：革兰氏阴性细菌、革兰氏阳性细菌、真菌、寄生虫、肿瘤细胞等。抗菌活性小肽对细菌有很强的杀伤作用，尤其是其对某些耐药性病原菌的杀灭作用更引起了人们的重视。

我国畜禽养殖业中生猪、蛋鸡和肉鸡占有重要比重，各种细菌性传染病严重威胁着养殖业，导致饲料报酬率降低，成活率下降，增重缓慢，生长发育停滞甚至死亡，严重威胁着养殖业的健康发展。例如，仔猪腹泻是集约化养猪生产条件下的一种典型的多因素性疾病，主要由革兰氏阴性细菌和革兰氏阴性菌猪痢疾密螺旋体导致，传播流行期长，发病率高死亡率低且易复发；鸡沙门氏菌病是由沙门氏菌属成员引起的一组传染病，主要包括鸡白痢、鸡伤寒和鸡副伤寒，发病率和致死率高，病鸡即使康复，生产性能也会下降，常终身带菌成为传染源，对种鸡场危害很大；沙门氏菌病是人兽共患病，带菌的产品常引起人的食物中毒，是公共卫生上的重大危害。

为了预防和治疗猪细菌性腹泻等和鸡沙门氏菌病等细菌性传染病，养殖场大量使用而各种抗生素和化学药物，造成了肉类抗生素和化药残留超标，不仅威胁人们的身体健康，也使肉类的品质和价格难以提高。

发明内容

本发明的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。

本发明还有一个目的是提供一种枯草芽孢杆菌，为经过诱变筛选获得的抗菌活性进一步得到增强的菌株，使之能在动物肠道内持续分泌表达Ericin1a抗菌肽，兼有益生菌和抗菌活性小肽的优点，并且无毒副作用，无抗生素残留，代替传统抗生素的使用，提升生命科学技术水平。