[发明专利]抗CA724抗体或其抗原结合片段及其制备方法和应用

说明书

本申请涉及一种新的抗CA724抗体，所述抗体能够很好地识别CA724，并具有高亲和力和特异性。所述抗体具有良好的稳定性，能够用于制备诊断癌症的诊断剂或检测CA724的产品，为CA724检测提供了一种新的选择。

技术领域

本申请属于免疫技术领域，尤其涉及抗CA724抗体或其抗原结合片段及其制备方法和应用。

背景技术

CA724是近几年临床常用的一个肿瘤指标，主要用于消化道肿瘤的早期筛查，属于非特异性肿瘤标志物。其本质是细胞表面黏蛋白类的高分子糖蛋白，广泛分布于上皮细胞和恶性肿瘤的细胞质内，相对分子质量为(220-400)×10³，可被cc49和B72.3两种单克隆抗体识别。CA724是构成肿瘤细胞骨架成分的重要分子结构，分子结构中含有磷酸化的氨基酸序列，随着肿瘤细胞的异常增殖，可通过外分泌的方式释放入血液循环，正常人体血清中CA7246U/mL，当组织发生癌变，则可迅速入血，血清检测水平急剧升高。因此，CA724又属于癌胚抗原性质肿瘤标志物。

目前，研究中所提供的有关CA724的检测方法主要是电化学发光法，检测仪器多源自罗氏Elecsys1010、2010、170和601免疫测定分析仪。目前多采用cc49和B72.3两种单克隆抗体检测CA724，后者是 CA724的特异性抗体，利用抗原抗体夹心法的原理，对CA724水平进行检测。

胃癌的检测目前没有一个特异性的肿瘤指标，需依靠病理和手术进行诊断。CA724是现有与胃癌相关性最高的一个指标。CA724在胃癌患者中血清水平远远大于胃部良性病变患者和健康人群，对胃癌有较大的诊断参考价值。CA724对胃癌诊断特异度优于其他指标，如 CA199和CEA等。CA724在卵巢癌、非小细胞肺癌患者血清中水平也呈明显升高，同时对于肝癌和结直肠癌份的分级诊断有较大的参考价值。因此，对CA724的检测有较大的临床意义。

目前国内用于检测CA724的单克隆抗体基本自外国采购，灵敏度、特异性上都存在缺陷，因此，有需要提供更多的CA724单克隆抗体。

发明内容

为解决现有技术中CA724抗体可选择性不够、灵敏度和特异性上存在缺陷的问题，本发明提供一方面提供了一种抗CA724抗体或其抗原结合片段，其特征在于：所述抗体或其抗原结合片段具有至少一个选自SEQ ID NO：1、2、3的重链CDR结构域和/或至少一个选自SEQ ID NO：4、5、6的轻链CDR结构域。

在一个实施方案中，本发明的抗CA724抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体的重链可变区包括以下三个互补决定区CDR： SEQ ID NO:1所示的CDR1，SEQ ID NO:2所示的CDR2，和SEQ ID NO:3 所示的CDR3；所述抗体的轻链可变区包括以下三个互补决定区CDR： SEQ ID NO:4所示的CDR1'，SEQ ID NO:5所示的CDR2'，和SEQ ID NO: 6所示的CDR3'。

在一个实施方案中，本发明所述的抗CA724抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体的重链包含4个FR区，其中至少一个FR 区的氨基酸序列具有如SEQ ID NO：7、8、9或10所示的氨基酸序列或者与SEQ ID NO：7、8、9或10具有至少80％、85％、90％、95％、98％或99％的序列同源性的序列；所述抗体的轻链包含4个FR区，其中至少一个FR区的氨基酸序列具有如SEQ ID NO：11、12、13或 14所示的氨基酸序列或者与SEQ ID NO：11、12、13或14具有至少 80％、85％、90％、95％、98％或99％的序列同源性的序列。

在一个实施方案中，本发明的抗CA724抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体的重链可变区具有如SEQ ID NO:15所示的氨基酸序列；所述抗体的轻链可变区具有如SEQ ID NO:16所示的氨基酸序列。