[发明专利]绵羊高渗络合剂精液稀释保存液及其应用方法

权利要求书

1.一种绵羊高渗络合剂精液稀释保存液，其特征在于：所述绵羊高渗络合剂精液稀释保存液是由2.4g二水柠檬酸三钠、1.0g葡萄糖、0.8g脲、0.05g KCl和0.02g EDTA-Na₂与双重蒸馏水定容至100mL配制而成。

2.根据权利要求1所述的绵羊高渗络合剂精液稀释保存液的应用方法，其特征在于：所述应用方法具体包括如下步骤：

(1)器皿准备：

玻璃、陶瓷类器皿，常规洗涤后再用去离子水冲洗，高温高压灭菌；橡胶类用具用质量浓度为75％的酒精消毒后，在装有紫外线灯的保温箱30℃中蒸发8h以上；

(2)配制保存液：

取二水柠檬酸三钠2.4g、葡萄糖1.0g、脲0.8g、KCl 0.05g和EDTA-Na₂0.02g与双重蒸馏水定容至100mL制成保存液；滤过除菌，无菌操作灌封安瓶，备用；

(3)精液采集：

在采集精液时，假阴道涂润滑剂，装卸集精杯均在酒精灯火焰上方20cm处进行，假阴道阴茎入口采精前后及时用无菌纱布遮盖，严格履行无菌操作的采精程序；

(4)精液稀释：

取按无菌操作要求采集的精液，精子活力为0.7以上，密度中等，精子畸形率低于15％的精液供使用；用配制好的保存液与精液在16℃等温条件下进行稀释，精液的稀释倍数根据精液的质量和需要决定；

(5)稀释精液的保存：

稀释后的精液吸入灭菌玻璃注射器内，注射器的吸嘴用折弯封闭的针头戴上，防止空气与精液接触，室温下缓冲30min，用3～4层毛巾包裹后放入0～8℃的环境条件下保存；

(6)稀释精液的复苏：

稀释精液从0～8℃的环境条件下取出，在室温中放置30min，然后在38℃温度条件下温育30min；

(7)输精：

38℃温育30min后，检查精子活力不低于0.6，精子运动形态正常，则保存的精液不再复苏，直接输精于母羊的子宫颈口内，自然插入，越深越好；

(8)受胎：

行为观察三个发情周期，若未见发情则用B超仪做超声检查是否有胎盘。

3.根据权利要求2所述的绵羊高渗络合剂精液稀释保存液的应用方法，其特征在于：步骤(7)中，绵羊高渗络合剂保存的精液每次输精有效精子数为4000～8000万个。