[发明专利]一种沼泽红假单胞菌及其制备5-ALA的用途和方法在审
申请号: | 202111081797.9 | 申请日: | 2021-09-15 |
公开(公告)号: | CN113862179A | 公开(公告)日: | 2021-12-31 |
发明(设计)人: | 丁千岭;郝祥蕊;吴小珍;张红艳;冯镇泰 | 申请(专利权)人: | 上海农乐生物制品股份有限公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12P13/00;C07C227/40;C07C229/22;C12R1/01 |
代理公司: | 上海光华专利事务所(普通合伙) 31219 | 代理人: | 王秋霞;许亦琳 |
地址: | 201419 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 沼泽 红假单胞菌 及其 制备 ala 用途 方法 | ||
1.一种沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris),保藏编号为CGMCCNO.22151。
2.根据权利要求1所述的沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris),其特征在于,所述沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)的16小时5-氨基乙酰丙酸产量为4.8g/L以上。
3.权利要求1所述的沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)在制备5-氨基乙酰丙酸中的用途。
4.一种5-氨基乙酰丙酸的制备方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:
1)将权利要求1所述的沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)经活化、扩大培养制得沼泽红假单胞菌原液;
2)将步骤1)中制得的原液接种至发酵培养基中培养,得到发酵液;
3)从发酵液中分离提取得到5-氨基乙酰丙酸。
5.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,所述制备方法的步骤1)中还包括以下条件中的一项或多项:
a)培养温度为30-35℃;
b)培养pH为7.0-7.5;
c)培养光照强度为2500-3000Lx;
d)扩大培养时的接种体积为培养体积的10-20%;
e)扩大培养的培养时间为3-7天。
6.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,所述制备方法的步骤2)中还包括以下条件中的一项或多项:
a)培养体系内的通气比为1:0.05~1:0.2;
b)使用发酵罐作为培养容器;
c)在避光条件下培养。
7.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,所述制备方法步骤2)中还包括以下条件中的一项或多项:
a)培养温度为30-35℃;
b)培养pH为7.0-7.5;
c)沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)的原液接种体积为培养基体积的20~40%(v/v);
d)培养时间为16-24小时;
e)培养体系的压力为0.01~0.03MPa;
f)发酵液中沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)的数量为60×108~80×108个/毫升。
8.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,所述制备方法步骤2)中分离提取包括以下步骤:
1)向发酵液中加入絮凝剂进行絮凝,过滤后得到一次滤清液;
2)向一次滤清液中加入吸附剂,过滤后得到二次滤清液;
3)5-氨基乙酰丙酸从二次滤清液中结晶析出,将析出的晶体从二次滤清液中分离得到5-氨基乙酰丙酸。
9.根据权利要求8所述的制备方法,其特征在于,还包括以下特征中的一项或多项:
a)所述絮凝剂为复合生物絮凝剂;
b)所述絮凝剂的添加比例为发酵液体积的1.0-2.0%;
c)所述吸附剂为活性炭吸附剂;
d)所述吸附剂的添加比例为发酵液体积的0.1-0.2%;
e)步骤3)中向二次滤清液中加入氢氧化钾使5-氨基乙酰丙酸从二次滤清液中结晶析出;
f)还包括将步骤3)分离得到的5-氨基乙酰丙酸真空干燥。
10.根据权利要求9所述的制备方法,其特征在于,还包括以下特征中的一项或多项:
a)所述复合生物絮凝剂包括氯化钙和磷酸氢二钠;
b)真空干燥的条件为:温度25-40℃,真空度-0.05~0.1MPa,时间为12-24小时,干燥至水分2.0%以下。
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