[发明专利]一种沼泽红假单胞菌及其制备5-ALA的用途和方法在审

专利信息
申请号: 202111081797.9 申请日: 2021-09-15
公开(公告)号: CN113862179A 公开(公告)日: 2021-12-31
发明(设计)人: 丁千岭;郝祥蕊;吴小珍;张红艳;冯镇泰 申请(专利权)人: 上海农乐生物制品股份有限公司
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20;C12P13/00;C07C227/40;C07C229/22;C12R1/01
代理公司: 上海光华专利事务所(普通合伙) 31219 代理人: 王秋霞;许亦琳
地址: 201419 *** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 一种 沼泽 红假单胞菌 及其 制备 ala 用途 方法
【权利要求书】:

1.一种沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris),保藏编号为CGMCCNO.22151。

2.根据权利要求1所述的沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris),其特征在于,所述沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)的16小时5-氨基乙酰丙酸产量为4.8g/L以上。

3.权利要求1所述的沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)在制备5-氨基乙酰丙酸中的用途。

4.一种5-氨基乙酰丙酸的制备方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:

1)将权利要求1所述的沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)经活化、扩大培养制得沼泽红假单胞菌原液;

2)将步骤1)中制得的原液接种至发酵培养基中培养,得到发酵液;

3)从发酵液中分离提取得到5-氨基乙酰丙酸。

5.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,所述制备方法的步骤1)中还包括以下条件中的一项或多项:

a)培养温度为30-35℃;

b)培养pH为7.0-7.5;

c)培养光照强度为2500-3000Lx;

d)扩大培养时的接种体积为培养体积的10-20%;

e)扩大培养的培养时间为3-7天。

6.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,所述制备方法的步骤2)中还包括以下条件中的一项或多项:

a)培养体系内的通气比为1:0.05~1:0.2;

b)使用发酵罐作为培养容器;

c)在避光条件下培养。

7.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,所述制备方法步骤2)中还包括以下条件中的一项或多项:

a)培养温度为30-35℃;

b)培养pH为7.0-7.5;

c)沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)的原液接种体积为培养基体积的20~40%(v/v);

d)培养时间为16-24小时;

e)培养体系的压力为0.01~0.03MPa;

f)发酵液中沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)的数量为60×108~80×108个/毫升。

8.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,所述制备方法步骤2)中分离提取包括以下步骤:

1)向发酵液中加入絮凝剂进行絮凝,过滤后得到一次滤清液;

2)向一次滤清液中加入吸附剂,过滤后得到二次滤清液;

3)5-氨基乙酰丙酸从二次滤清液中结晶析出,将析出的晶体从二次滤清液中分离得到5-氨基乙酰丙酸。

9.根据权利要求8所述的制备方法,其特征在于,还包括以下特征中的一项或多项:

a)所述絮凝剂为复合生物絮凝剂;

b)所述絮凝剂的添加比例为发酵液体积的1.0-2.0%;

c)所述吸附剂为活性炭吸附剂;

d)所述吸附剂的添加比例为发酵液体积的0.1-0.2%;

e)步骤3)中向二次滤清液中加入氢氧化钾使5-氨基乙酰丙酸从二次滤清液中结晶析出;

f)还包括将步骤3)分离得到的5-氨基乙酰丙酸真空干燥。

10.根据权利要求9所述的制备方法,其特征在于,还包括以下特征中的一项或多项:

a)所述复合生物絮凝剂包括氯化钙和磷酸氢二钠;

b)真空干燥的条件为:温度25-40℃,真空度-0.05~0.1MPa,时间为12-24小时,干燥至水分2.0%以下。

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