[发明专利]识别HLA-CW8限制性突变KRAS的T细胞受体

权利要求书

1.产生工程改造的人细胞群的方法，所述方法包括：

将重组表达载体引入人细胞群，其中所述重组表达载体包含编码T细胞受体(TCR)的核苷酸序列，所述TCR包含：

(a)含有SEQ ID NO:3的氨基酸序列的α链互补决定区(CDR)1，含有SEQ ID NO:4的氨基酸序列的α链CDR2，以及含有SEQ ID NO:5的氨基酸序列的α链CDR3；和

(b)含有SEQ ID NO:6的氨基酸序列的β链CDR1，含有SEQ ID NO:7的氨基酸序列的β链CDR2，以及含有SEQ ID NO:8的氨基酸序列的β链CDR3。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述TCR对在人白细胞抗原(HLA)-Cw8分子下呈递的突变的KRAS氨基酸序列GADGVGKSA(SEQ ID NO:18)具有抗原特异性。

3.如权利要求2所述的方法，其中所述HLA-Cw8分子为HLA-Cw*0802。

4.如权利要求1-3任一项所述的方法，其中所述重组表达载体包含编码以下的核苷酸序列：

(a)含有与SEQ ID NO:9的氨基酸序列具有至少99％同一性的氨基酸序列的α链可变区；

(b)含有与SEQ ID NO:10的氨基酸序列具有至少99％同一性的氨基酸序列的β链可变区；或

(c)(a)和(b)。

5.如权利要求1-3任一项所述的方法，其中所述重组表达载体包含编码以下的核苷酸序列：

(a)含有SEQ ID NO:9的氨基酸序列的α链可变区；

(b)含有SEQ ID NO:10的氨基酸序列的β链可变区；或

(c)(a)和(b)。

6.如权利要求1-3任一项所述的方法，其中所述重组表达载体包含编码以下的核苷酸序列：

(a)含有与SEQ ID NO:11的氨基酸序列具有至少99％同一性的氨基酸序列的α链恒定区，其中：

(i)SEQ ID NO:11的第48位的X为Thr或Cys；

(ii)SEQ ID NO:11的第112位的X为Ser、Ala、Val、Leu、Ile、Pro、Phe、Met或Trp；

(iii)SEQ ID NO:11的第114位的X为Met、Ala、Val、Leu、Ile、Pro、Phe或Trp；以及

(iv)SEQ ID NO:11的第115位的X为Gly、Ala、Val、Leu、Ile、Pro、Phe、Met或Trp；

(b)含有与SEQ ID NO:12的氨基酸序列具有至少99％同一性的氨基酸序列的β链恒定区，其中SEQ ID NO:12的第57位的X为Ser或Cys；或

(c)(a)和(b)。

7.如权利要求1-3任一项所述的方法，其中所述重组表达载体包含编码以下的核苷酸序列：

(a)含有SEQ ID NO:11的氨基酸序列的α链恒定区，其中：

(i)SEQ ID NO:11的第48位的X为Thr或Cys；

(ii)SEQ ID NO:11的第112位的X为Ser、Ala、Val、Leu、Ile、Pro、Phe、Met或Trp；

(iii)SEQ ID NO:11的第114位的X为Met、Ala、Val、Leu、Ile、Pro、Phe或Trp；以及

(iv)SEQ ID NO:11的第115位的X为Gly、Ala、Val、Leu、Ile、Pro、Phe、Met或Trp；

(b)含有SEQ ID NO:12的氨基酸序列的β链恒定区，其中SEQ ID NO:12的第57位的X为Ser或Cys；或

(c)(a)和(b)。