[发明专利]一种檀香烯合酶突变体及其制备方法有效
| 申请号： | 202111085704.X | 申请日： | 2021-09-16 |
| 公开（公告）号： | CN113801868B | 公开（公告）日： | 2023-07-28 |
| 发明（设计）人： | 李迅;张佳;王询;王飞 | 申请（专利权）人： | 南京林业大学 |
| 主分类号： | C12N9/88 | 分类号： | C12N9/88;C12N15/70;C12N15/60 |
| 代理公司： | 南京禹为知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 32272 | 代理人： | 王晓东 |
| 地址： | 210037 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 檀香 烯合酶 突变体 及其 制备 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种檀香烯合酶SanSyn突变体，其特征在于：所述檀香烯合酶SanSyn突变体为将氨基酸序列为SEQ ID NO.1所示的野生型SanSyn酶的第527位谷氨酰胺突变为丙氨酸，其中，所述野生型SanSyn酶来源于植物黄皮（
2.如权利要求1所述的檀香烯合酶突变体，其特征在于：所述檀香烯合酶突变体的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。
3.如权利要求1所述的檀香烯合酶突变体的制备方法，其特征在于：所述制备方法，包括，
将核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示的野生型SanSyn酶基因连接到质粒pETDuet-tac中，得到重组质粒pETDuet-tac-SanSyn，其中，所述连接的双酶切位点分别为NcoI和BamHI，所述质粒pETDuet-tac的核苷酸序列如SEQ ID NO.30所示；
设计突变引物Q527A-F、Q527A-R，核苷酸序列分别为GCCGATCGCTTTACCCATAGTAC、TGCATTACCATACATAAAATCTGCG；
使用突变引物并以质粒pETDuet-tac-SanSyn为模板进行PCR扩增得到突变产物，转化到宿主细胞大肠杆菌TOP 10的感受态细胞中，筛选得到檀香烯合酶SanSyn突变体表达菌株，诱导表达，得到檀香烯合酶突变体。
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