[发明专利]一种用植物枝条诱导不含内生菌嫩芽的方法

权利要求书

1.一种用植物枝条诱导不含内生菌嫩芽的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)选取二年生以上植物枝条，用自来水彻底洗净后晾干；

(2)晾干的植物枝条，底端向下，并将所述植物枝条底端4-6cm浸泡在生长溶液中静置处理1-3h；

其中所述生长溶液是将1-萘乙酸(NAA)与乙醇按照(0.5-2.5)g：(100-300)mL配比溶解后，用蒸馏水稀释而成；

(3)配制培养液，加入氨苄青霉素和庆大霉素溶液，将步骤(2)浸泡后的枝条转入培养液中，光照/黑暗交替密闭培养，获取不含内生菌嫩芽；

其中所述培养液为：1/2MS培养基+8.5-12g/L磷酸二氢钾，pH调至5.8-6.2。

2.如权利要求1所述的用植物枝条诱导不含内生菌嫩芽的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述植物枝条为早春植物抽芽长叶前选取的越冬休眠枝条。

3.如权利要求1所述的用植物枝条诱导不含内生菌嫩芽的方法，其特征在于，步骤(1)中，用清水对所述植物枝条进行清洗干净后，将其放置于背阳通风处摊开晾干30-40min。

4.如权利要求1所述的用植物枝条诱导不含内生菌嫩芽的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述生长溶液是将1-3g 1-萘乙酸用100-300mL乙醇溶解，然后再用蒸馏水定容至3.5-6.0L得到。

5.如权利要求1所述的用植物枝条诱导不含内生菌嫩芽的方法，其特征在于，将步骤(2)浸泡后的枝条基部浸泡到所述培养液中，于12h光照、温度为22-25℃，12h黑暗、温度为17-19℃的条件下培养，7天后即能获取不含内生菌嫩芽。

6.如权利要求1所述的用植物枝条诱导不含内生菌嫩芽的方法，其特征在于，步骤(3)中，培养期间，每24h更换一次所述培养液。

7.如权利要求1所述的用植物枝条诱导不含内生菌嫩芽的方法，其特征在于，步骤(3)中，待不含内生菌的嫩芽长到1-2cm，即可将所述嫩芽取下，然后嫩芽所在的植物枝条继续放回所述培养液进行培养，如此反复，每个所述植物枝条可采收4-5批次无菌嫩芽。

8.如权利要求1-7任一项所述的方法在蓝果树组织培养中的应用，其特征在于，应用于组培诱导蓝果树不含内生菌嫩芽生成中。