[发明专利]一种人SERPINB7基因突变快速分型检测方法

权利要求书

1.一种用于检测人SERPINB7基因突变的引物探针组合物，其特征在于，包括如下至少一个基因位点的引物对及对应探针的序列，或者互补序列：

c.796CT位点为：序列如SEQ ID No.1及SEQ ID No.2所示的引物，序列如SEQ ID No.3和/或SEQ ID No.4所示探针；

c.522_523insT位点为：序列如SEQ ID No.5及SEQ ID No.6所示引物，序列如SEQ IDNo.7和/或SEQ ID No.8所示探针；

c.650_653delCTGT位点择一为：序列如SEQ ID No.9及SEQ ID No.10所示引物，序列SEQ ID No.12所示探针；或，序列如SEQ ID No.9及SEQ ID No.11所示引物，序列SEQ IDNo.13所示探针；

c.806_818delinsT位点为：序列如SEQ ID No.1及SEQ ID No.14所示引物，序列如SEQID No.15和/或SEQ ID No.16所示探针。

2.如权利要求1所述的引物探针组合物，其特征在于，任一所述探针的5’端连接荧光基团，任一所述探针的3’端连接荧光淬灭基团。

3.如权利要求2所述的引物探针组合物，其特征在于，任一所述探针连接的荧光基团独立地选自FAM、VIC、CY5、ROX、HEX、JOE、NED、Texas Red或CY3中的1种。

4.如权利要求3所述的引物探针组合物，其特征在于：

序列如SEQ ID No.3所示探针所连荧光基团为FAM，

序列如SEQ ID No.4所示探针所连荧光基团为ROX，

序列如SEQ ID No.7所示探针所连荧光基团为CY5，

序列如SEQ ID No.8所示探针所连荧光基团为ROX，

序列如SEQ ID No.12所示探针所连荧光基团为VIC，

序列如SEQ ID No.13所示探针所连荧光基团为FAM，

序列如SEQ ID No.15所示探针所连荧光基团为CY5，

序列如SEQ ID No.16所示探针所连荧光基团为VIC。

5.如权利要求2所述的引物探针组合物，其特征在于，任一所述探针连接的淬灭基团独立地选自MGB、BHQ-1、BHQ-2、BHQ-3或TAMRA中1种。

6.一种使用如权利要求1-5任一所述引物探针组合物的快速分型检测方法，其特征在于，检测的基因突变位点为SERPINB7基因的c.796CT、c.522_523insT、c.650_653delCTGT、c.806_818delinsT位点，所用的方法为TaqMan探针法。

7.如权利要求6所述的快速分型检测方法，其特征在于，所述c.796CT、c.522_523insT、c.650_653delCTGT、c.806_818delinsT位点需分组检测，所述分组检测至少为2组。

8.如权利要求7所述的快速分型检测方法，其特征在于，所述分组检测为2组时：

第一组检测位点包括c.796CT位点的突变型、c.522_523insT位点的野生型和突变型、c.650_653delCTGT位点的野生型；

第二组检测位点包括c.796CT位点的野生型、c.650_653delCTGT位点的突变型、c.806_818delinsT位点的野生型和突变型。

9.如权利要求8所述的快速分型检测方法，其特征在于，所述TaqMan探针法中的PCR扩增体系除引物探针组合物外，还包括DNA聚合酶、dNTP、Mg²⁺、ROX Dye。

10.如权利要求9所述的快速分型检测方法，其特征在于，所述PCR扩增体系还包括Tris、10mM～500mM的KCl、10mM～500mM的(NH₄)₂SO₄、1％～50％质量含量的甘油、0.001mg/mL～1mg/mL的BSA、0.1％～10％质量含量的Tween 20、1mM/mL～100mM/mL的二硫苏糖醇、0.1M～3M的甜菜碱以及0.1％～10％质量含量的DMSO。