[发明专利]一种3-甾酮-Δ1有效

申请号：	202111095415.8	申请日：	2021-09-17
公开（公告）号：	CN113528474B	公开（公告）日：	2021-12-10
发明（设计）人：	张瑞;王玉;冯进辉;陈曦;姚培圆;吴洽庆;朱敦明;马延和	申请（专利权）人：	中国科学院天津工业生物技术研究所
主分类号：	C12N9/02	分类号：	C12N9/02;C12N15/53;C12N15/70;C12N1/21;C12P33/02;C12R1/19
代理公司：	北京商专永信知识产权代理事务所(普通合伙) 11400	代理人：	欧阳石文
地址：	300308 天津***	国省代码：	天津;12
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摘要：
搜索关键词：	一种甾酮 base sup
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【权利要求书】：

1.一种3-甾酮-Δ¹-脱氢酶，或其编码多核苷酸，或含有所述的编码多核苷酸的基因工程表达菌株在3-酮基甾体化合物的Δ¹-脱氢反应中的应用；

其中所述3-甾酮-Δ¹-脱氢酶是如SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列的蛋白质；

且所述的3-酮基甾体化合物为以下化合物中的一种：雄甾-4-烯-3,17-二酮；雄甾-4-烯-3,11,17-三酮；雄甾-4,9(11)-二烯-3,17-二酮；17β-羟基雄甾-4-烯-3,17-二酮；孕甾-4-烯-3,20-二酮；4-孕烯-3,11,20-三酮；17α-羟基孕甾-4-烯-3,20-二酮；17α,21-双羟基孕甾-4-烯-3,20-二酮；17α,21-双羟基孕甾-4-烯-3,11,20-三酮；11β,17α,21-三羟基孕甾-4-烯-3,20-二酮；11β,17α,21-三羟基孕甾-4-烯-3,20-二酮-21-醋酸酯；21-羟基-孕甾-4,9(11),16-三烯-3,20-二酮-21-醋酸酯。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述编码多核苷酸如SEQ ID NO：2所示。

3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，含有所述的编码多核苷酸的基因工程表达菌株是通过将所述编码多核苷酸可操作连接到出发载体pET-21a中的多克隆位点上，并导入菌株中实现。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，基因工程表达菌株的出发菌株是大肠杆菌。

5.如权利要求1至4任一项所述的应用，其特征在于，以3-酮基甾体化合物为底物，加入电子受体，所述的电子受体是吩嗪硫酸甲酯或1,4-萘醌，进行转化反应得到C1,2位脱氢甾体化合物。

6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，反应温度为25-35℃，反应时间6-24 h。

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