[发明专利]一种三方益子膏中六种活性成分含量测定的方法

权利要求书

1.一种三方益子膏中六种活性成分含量的测定方法，其特征在于：该方法利用高效液相色谱法(HPLC)在同一实验条件下同时分离并测定三方益子膏中5-羟甲基糠醛、原儿茶酸、松果菊苷、补骨脂素、异补骨脂素和甘草酸的含量，具体步骤如下：(1)对照品溶液的制备：精密称取5-羟甲基糠醛对照品、原儿茶酸对照品、松果菊苷对照品、补骨脂素对照品、异补骨脂素对照品和甘草酸对照品适量，置于20mL容量瓶中，加入甲醇稀释定容，摇匀后制得每1mL分别含5-羟甲基糠醛0.263mg、原儿茶酸0.017mg、松果菊苷0.098mg、补骨脂素0.038mg、异补骨脂素0.049mg、甘草酸0.078mg的混合对照品溶液。(2)精密量取3g三方益子膏，置于具塞锥形瓶中，精密加入50.0mL甲醇，精密称重；超声(功率200W，频率40kHz)处理30min后，放冷至室温，再次精密称重，补足减失的重量并摇匀，经0.22μm微孔滤膜过滤，即得供试品溶液。(3)分离检测：将混合对照品溶液和供试品溶液分别注入高效液相色谱仪，采用如下色谱条件检测：色谱柱：Agilent 5 TC-C18(4.6×250mm)色谱柱；检测波长：0-15min时260nm，15-30min时330nm，30-60min时252nm；流动相：0.1％磷酸水溶液(A)-乙腈(B)；梯度洗脱为0-5min时5％B，5-12min时5％B→7％B，12-26min时7％B→15％B，26～35min时15％B→50％B，35-45min时50％B，45-60min时50％B→85％B；柱温：35℃；流速：1.0mL/min；进样量：10μL，即可。