[发明专利]一种药物的筛选方法以及三维肿瘤切片模型的培养方法

权利要求书

1.一种药物的筛选方法，其特征在于，其包括以下步骤：对三维肿瘤切片模型进行三维培养；其中，所述三维肿瘤切片模型的制备方法包括：将标记有细胞凋亡报告物质的肿瘤组织进行切片处理，获得所述三维肿瘤切片模型；

采用候选药物对三维培养中的三维肿瘤切片模型进行处理，基于所述凋亡细胞报告物质的信号筛选候选药物。

2.根据权利要求1所述的药物的筛选方法，其特征在于，所述三维肿瘤切片的厚度为200～300μm；

优选地，所述切片处理的方法如下：采用凝胶对肿瘤组织进行包裹后切片；

优选地，所述三维培养的条件如下：采用插入式细胞培养皿对三维肿瘤切片进行三维培养，采用的培养液中包含体积分数为15％～20％的胎牛血清以及40～60μg/ml庆大霉素。

3.根据权利要求1所述的药物的筛选方法，其特征在于，所述细胞凋亡报告物质包括：用于检测细胞凋亡的传感器；

优选地，所述传感器包括caspase-3传感器。

4.根据权利要求3所述的药物的筛选方法，其特征在于，标记有细胞凋亡报告物质的肿瘤组织的获取方法如下：将所述标记有细胞凋亡报告物质的细胞或其培养物导入动物或动物模型的皮下组织，以形成所述肿瘤组织。

5.根据权利要求1～4任一项所述的药物的筛选方法，其特征在于，在采用三维肿瘤切片模型对候选药物进行筛选前，所述筛选方法还包括：采用标记有细胞凋亡报告物质的肿瘤细胞模型对药物进行预筛选，以获得所述候选药物。

6.根据权利要求1～4任一项所述的药物的筛选方法，其特征在于，在采用三维肿瘤切片模型进行药物筛选后，所述筛选方法还包括：对临床肿瘤切片样本进行三维培养，将候选药物或经三维肿瘤切片模型筛选后的药物对三维培养中的临床肿瘤切片样本进行处理，基于临床肿瘤切片样本中的内源性荧光物的信号筛选药物。

7.根据权利要求6所述的药物的筛选方法，其特征在于，所述内源性荧光物包括：脂褐素、黄素、芳香族氨基酸和NADH中的至少一种；

优选地，当所述内源性荧光物为脂褐素时，内源性荧光物的荧光检测条件如下：单光子的激发波长为488～570nm，双光子的激发波长为970～1140nm，发射波长为550～700nm。

8.一种三维肿瘤切片模型的培养方法，其特征在于，其包括：对三维肿瘤切片模型进行三维培养；其中，所述三维肿瘤切片模型的制备方法包括：将标记有细胞凋亡报告物质的肿瘤组织进行切片处理，获得所述三维肿瘤切片模型；

优选地，所述三维肿瘤切片的厚度为200～300μm；

优选地，所述切片处理的方法如下：采用凝胶对肿瘤组织进行包裹后切片；

优选地，所述三维培养的条件如下：采用插入式细胞培养皿对三维肿瘤切片进行三维培养，采用的培养液中包含体积分数为15％～20％的胎牛血清以及40～60μg/ml庆大霉素。

9.一种用于筛选药物的方法，其特征在于，其包括以下步骤：对临床肿瘤切片样本进行三维培养，将候选药物对三维培养中的临床肿瘤切片样本进行处理，基于临床肿瘤切片样本中的内源性荧光物的信号进一步筛选药物。

10.一种实时预测药物反应的方法，其特征在于，其包括：对三维肿瘤切片模型进行三维培养；其中，所述三维肿瘤切片模型的制备方法包括：将标记有细胞凋亡报告物质的肿瘤组织进行切片处理，获得所述三维肿瘤切片模型；

采用候选药物对三维培养中的三维肿瘤切片模型进行处理，基于所述细胞凋亡报告物质的信号实时预测候选药物的反应。