[发明专利]一种检测5-对硝基苯基糠醛有关物质的方法

权利要求书

1.一种检测5-对硝基苯基糠醛有关物质的方法，其包括：

(a)将供试品和对照品溶解于稀释剂，获得供试品溶液和对照品溶液；

(b)分别对所述供试品溶液和所述对照品溶液进行高效液相色谱检测；

其中，所述供试品为5-对硝基苯基糠醛原料药；

所述高效液相色谱检测的条件包括：

在365nm和275nm的检测波长下，以苯基硅烷键合硅胶为色谱柱的填充剂，以乙酸铵水溶液为流动相A，所述乙酸铵水溶液的pH为8.4～8.6，以乙腈为流动相B，采用梯度洗脱的方式洗脱；

所述有关物质为对硝基苯酚、对硝基苯胺、对硝基氯苯以及糠醛；

以所述流动相A和所述流动相B的体积分数计，所述梯度洗脱的程序包括：

0min～6min，以55％流动相A-45％流动相B洗脱；

6min～7min，以30％流动相A-70％流动相B洗脱；

7min～13min，以2％流动相A-98％流动相B洗脱；

13min～15min，以55％流动相A-45％流动相B洗脱。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，在步骤(a)中，所述稀释剂为DMF、乙酸、丙酮、以及60wt.％的乙腈水溶液的混合物。

3.根据权利要求1所述的方法，其中，所述乙酸铵水溶液的浓度为3.5g/L～4.0g/L。

4.根据权利要求3所述的方法，其中，所述乙酸铵水溶液的浓度为3.85g/L。

5.根据权利要求1所述的方法，其中，所述乙酸铵水溶液的pH为8.5。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中，所述色谱柱的柱温为20℃～30℃。

7.根据权利要求6所述的方法，其中，所述色谱柱的柱温为25℃。

8.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中，所述流动相的流速为0.9mL/min～1.1mL/min。

9.根据权利要求8所述的方法，其中，所述流动相的流速为1.0mL/min。

10.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中，在步骤(a)中，所述对照品溶液为5-对硝基苯基糠醛对照品以及所述有关物质的对照品的混合对照品溶液。

11.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中，在365nm的检测波长下检测5-对硝基苯基糠醛、对硝基苯酚、以及对硝基苯胺，在275nm的检测波长下检测对硝基氯苯和糠醛。

12.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中，所述供试品溶液的浓度为0.2mg/mL～0.6mg/mL。

13.根据权利要求12所述的方法，其中，所述供试品溶液的浓度为0.25mg/mL。

14.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中，所述对照品溶液中各物质的浓度为40ng/mL～120ng/mL。

15.根据权利要求14所述的方法，其中，所述对照品溶液中各物质的浓度为50ng/mL。

16.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中，所述色谱柱为ACEphenyl4.6mm×250mm×5.0μm色谱柱。

17.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中，采用外标法计算所述有关物质的含量。