[发明专利]一种调节PRV感染的组合物及其应用

说明书

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种调节PRV感染的组合物及其应用。一种调节PRV感染的组合物，所述的组合物含有Ku蛋白。所述的组合物至少包含Ku70蛋白或Ku80蛋白中的一种。与现有技术相比，本发明提供的一种抑制PRV感染的组合物及其应用的优点：(1)Ku蛋白易于获取、无致病性、安全性高。(2)Ku蛋白在生产和操作时安全无害、无传染性。(3)Ku蛋白抑制PRV感染具有高特异性和高敏感性。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种调节PRV感染的组合物及其应用。

背景技术

伪狂犬病(pseudorabies，PR又称Aujeszky’s disease，AD)是一种由伪狂犬病病毒(pseudorabies virus，PRV)引起的病毒性疾病。自20世纪80年代以来一直在全球范围内传播，经典伪狂犬病毒于1902年首次被分离出来。伪狂犬病毒具有极强的传染性，猪是自然宿主，感染伪狂犬病毒之后会通过排泄物和其他身体分泌物排出大量病毒。伪狂犬病毒主要通过直接接触传播，但也可能通过空气、水和受污染的污染物传播。不同年龄不同健康状况的猪感染伪狂犬病毒表现出的症状有所差异。成年猪感染多表现为呼吸系统症状，发病率高但死亡率较低。哺乳期仔猪感染表现为体温升高，食欲不振。随着感染的进一步发展，病猪逐步表现出中枢神经症状，如震颤、旋转、麻痹等，死亡率接近100％。怀孕母猪感染该病毒一般表现为流产、产死胎，容易造成母猪不孕症。用PRV减毒活疫苗株Bartha-K61疫苗免疫猪，可有效控制病毒传播，但是不能防止病毒感染。

PRV病毒属于疱疹病毒科α疱疹病毒亚科痘病毒属，与同属的人疱疹病毒1型(HSV-1)在进化上同源性最高，属于相同分支。PRV病毒粒子为圆形或椭圆形，从里到外依次由病毒核酸、衣壳、被膜以及囊膜组成。核酸位于二十面体的衣壳内，被膜在衣壳和囊膜之间，有两层，分别与衣壳蛋白和囊膜蛋白相连。PRV的基因组大小为147kb，基因组呈现线状双链DNA，G+C含量高达74％，有两个独特区，分别为长独特区(UL)和短独特区(US)以及位于US两侧的内部重复序列(IRS)和末端反向重复序列(TRS)。根据表达时间的不同，PRV基因分为即早期基因、早期基因和晚期基因，能编码多达70个蛋白质。

早期蛋白质EP0是HSV-1蛋白ICP0的同系物。EP0在N端具有环指结构域(氨基酸1-84)，与1型单纯疱疹病毒HSV-1的ICP0蛋白，带状疱疹VZV的ORF61蛋白和马疱疹病毒1型BHV-1蛋白BICP0的Ring-finger区域高度同源。PRV EP0和IE180合作激活病毒基因转录和增强病毒DNA的传染性。另外，EP0的环指结构域和酸性区域(氨基酸114-242)是必需的反式激活区域。EP0缺陷重组伪狂犬病病毒的研究表明，EP0基因对伪狂犬病病毒是非必需的但可能对从潜伏状态中重新激活很重要。EP0可以激活由TATA启动子启动转录的蛋白质。EP0是转录因子，能激活许多病毒蛋白的表达如IE180、UL23和US4。而EP0对其他疱疹病毒的同源蛋白也有转录因子活性，如VZV病毒的ORF29基因，HSV-1病毒的UL23(胸苷激酶)基因和猴病毒40(SV40)早期基因。然而，EP0对UL41(Vhs)与gE基因的启动子活性具有抑制作用。

DNA损伤反应(DNAdamage response，DDR)是细胞为了对抗DNA损伤带来的威胁，进化出的一种检测并修复损伤的机制。DNA双链断裂主要通过非同源末端连接(NHEJ)和同源重组(HR)两种方式修复。NHEJ只是简单地连接双螺旋，没有或很少加工，而HR则需要通过特定的核酸酶加工DSB末端形成一个3'-ssDNA，并依赖于这3'-ssDNA尾部与完整的同源序列的识别和配对。