[发明专利]一种用于口蹄疫病毒检测的试剂盒及其检测方法

权利要求书

1.一种用于口蹄疫病毒检测的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：crRNA、T7转录酶、NTP、探针、Cas13a和核酸扩增试剂；

所述核酸扩增试剂包括引物对，所述引物对选自如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示的核酸序列，和/或如SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示的核酸序列；

所述crRNA选自如SEQ ID No.5和SEQ ID No.6所示的核酸序列。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述核酸扩增试剂还包括RPA或RAA的扩增试剂。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述crRNA的浓度为10μM，所述T7转录酶的浓度为1mg/mL，所述NTP的浓度为100mM，所述探针的浓度为10μM，所述Cas13a的浓度为1mg/mL。

4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括：反应缓冲液和水。

5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：crRNA 1μL、T7转录酶1.5μL、NTP 4μL、探针2.5μL、Cas13a 0.5μL、核酸扩增产物2.5μL、反应缓冲液2.5μL和水11μL；所述核酸扩增产物通过所述核酸扩增试剂扩增得到。

6.根据权利要求1至5任一项所述的试剂盒的使用方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、通过所述核酸扩增试剂得到核酸扩增产物；

S2、将所述核酸扩增产物与crRNA、T7转录酶、NTP、探针和Cas13a按比例混合得到反应溶液；

S3、所述反应溶液进行反应并收集荧光。

7.根据权利要求6所述的使用方法，其特征在于，步骤S1中所述通过所述核酸扩增试剂得到核酸扩增产物包括：

使用RPA或RAA的系统进行扩增得到所述核酸扩增产物；和/或

通过苯酚氯仿法纯化得到所述核酸扩增产物。

8.根据权利要求6所述的使用方法，其特征在于，步骤S2中所述反应溶液的组成为：crRNA 1μL、T7转录酶1.5μL、NTP 4μL、探针2.5μL、Cas13a 0.5μL、所述核酸扩增产物2.5μL、反应缓冲液2.5μL和水11μL。

9.根据权利要求6所述的使用方法，其特征在于，步骤S3中所述反应溶液进行反应并收集荧光包括：

所述进行反应的温度为39℃；和/或

所述收集荧光的时间为30min～120min。

10.根据权利要求1至5任一项所述的试剂盒在非诊断治疗目的的口蹄疫病毒检测中的应用。