[发明专利]泡桐内桐皮总黄酮的提取方法及其应用

说明书

本发明涉及泡桐研究技术领域，具体涉及一种泡桐内桐皮总黄酮的提取方法及其应用。本发明用70%乙醇溶液对泡桐内桐皮粉末进行提取，制备的泡桐内桐皮总黄酮具有最佳的抗炎活性，能够有效抑制促炎因子的表达，且呈剂量依赖性方式，具有极好的抗炎效用。

技术领域

本发明属于抗炎药物研发技术领域，具体涉及一种泡桐内桐皮总黄酮的提取方法及其应用。

背景技术

炎症反应是有害刺激条件下激发的复杂的生理过程，如炎性损伤，是机体对于刺激的一种防御反应。机体的免疫系统对监测并消除这种有害刺激并愈合损伤。几种类型的免疫细胞通过调节炎症介质的水平来维持体内平衡。巨噬细胞是最重要的炎症调节细胞，在炎症反应中具有三大功能，即抗原呈递、吞噬和免疫调节，抑制各种炎症细胞因子和生长因子。因此，巨噬细胞在炎症的发生、维持和解决中起着关键作用。抗炎药物大致可以分为两大类，一类是解热镇痛药又称非留体抗炎药，具有解热、镇痛、抗炎、抗风湿的作用。例如：阿司匹林、对乙酰氨基酷、安乃近、布洛芬、双氯灭痛、氯灭酸、安乃近、氨基比弗、萘普生、吡罗昔康、塞米昔布等；第二类是甾体类抗炎药，属于皮质激素类药物，例如：糖皮质激素等。非甾体类抗炎药物作用弱，副作用主要是胃肠道反应，还有心血管疾病的风险；甾体类抗炎药的抗炎作用强，但存在水钠潴留、变虚胖、骨质疏松等副作用。因此,从传统中药材或天然产物中寻找低毒高效的抗炎药物已成为当今世界新药开发的热点。而非甾体抗炎药常用于调节上述信号通路，降低炎症介质水平。关于非甾体类抗炎药物的副作用也使得草药或传统草药作为治疗炎症的补充和替代药物的使用近年来有所增加。

兰考泡桐(Paulownia elongata S. Y. Hu)是玄参科泡桐属植物，在民间，泡桐树皮的汁液常被人民用于治疗蜂蛰和蚊虫叮咬等急性炎症，疗效极佳，但其具体机制仍不清楚。

发明内容

针对目前泡桐抗炎机制不清楚的问题，本发明提供一种泡桐内桐皮总黄酮的提取方法及其应用。

本发明解决其技术问题所采用的方案是：一种泡桐内桐皮总黄酮提取方法，包括以下步骤：

S1、将泡桐内桐皮干燥、粉碎、过筛制成泡桐内桐皮粉末；

S2、向泡桐内桐皮粉末中加入石油醚进行浸泡，用乙醇溶液在60℃下回流提取2次，提取1h得提取液，静置；

S3、将冷却上清液与残液分离后混合在转子蒸发器中过滤浓缩；

S4、用大孔吸附树脂进行色谱分离，然后用乙醇溶液，洗脱馏分真空浓缩后进行真空干燥制得成品，并将成品低温保存。

上述的泡桐内桐皮总黄酮的提取方法，步骤S2和步骤S4中所用乙醇溶液为70%乙醇溶液。

上述的泡桐内桐皮总黄酮的提取方法，步骤S4中将洗脱馏分在在40℃真空浓缩后在60℃条件下进行真空干燥。

上述的泡桐内桐皮总黄酮的提取方法，步骤S4中将成品置于-20℃条件下保存。

本发明还提供一种泡桐内桐皮总黄酮的应用，泡桐内桐皮总黄酮能够有效抑制炎症因子的表达，能够用于制备抗炎药物。

上述的应用，能够有效抑制IL-6和IL-6 mRNA及IL-1β mRNA的表达。

本发明的有益效果：本发明提供的泡桐内桐皮总黄酮的提取方法提取出的总黄酮的抗炎活性最佳，经泡桐总黄酮预处理的细胞上清液中促炎细胞因子的表达被显著抑制，且呈剂量依赖性方式，说明泡桐总黄酮能够有效抑制IL-6蛋白和IL-6 mRNA及IL-1β mRNA的表达，具有极好的抗炎效用。

附图说明

图1为本发明芦丁标准曲线图。

图2为泡桐总黄酮处理24h后RAW264.7巨噬细胞存活率。

图3为泡桐总黄酮对LPS激活的RAW264.7细胞系NO生成的影响。