[发明专利]一种CHI3L1抗原、抗体及预测自体动静脉内瘘失功的试剂盒

权利要求书

1.一种CHI3L1抗原表位肽，其特征在于，包括CHI3L1抗原表位肽Ⅰ和CHI3L1抗原表位肽Ⅱ，

所述CHI3L1抗原表位肽Ⅰ的氨基酸链片段Ⅰ为：

Cys-Cys-Cys-Thr-Cys-Thr-Cys-Ala-Cys-Cys-Ala，

所述CHI3L1抗原表位肽Ⅱ的氨基酸链片段Ⅱ为：

Ala-Thr-Gln-Cys-Cys-Ala-Thr-Cys-Ala-Ala。

2.根据权利要求1所述的一种CHI3L1抗原表位肽，其特征在于，将所述氨基酸链片段Ⅰ通过固相法合成所述CHI3L1抗原表位肽Ⅰ，将所述氨基酸链片段Ⅱ通过固相法合成所述CHI3L1抗原表位肽Ⅱ。

3.一种CHI3L1抗原，其特征在于，包括：通过使用权利要求2所述的CHI3L1抗原表位肽Ⅰ与载体蛋白KLH偶联制备CHI3L1抗原Ⅰ；通过使用权利要求2所述的CHI3L1抗原表位肽Ⅱ与载体蛋白KLH偶联制备CHI3L1抗原Ⅱ。

4.一种CHI3L1抗体，其特征在于，包括：由权利要求3所述的CHI3L1抗原Ⅰ制备的单克隆抗体Ⅰ；由权利要求3所述的CHI3L1抗原Ⅱ制备的单克隆抗体Ⅱ。

5.一种预测自体动静脉内瘘失功的试剂盒，其特征在于，包括权利要求4所述的单克隆抗体Ⅰ和单克隆抗体Ⅱ。

6.根据权利要求5所述的一种预测自体动静脉内瘘失功的试剂盒，其特征在于，包括单克隆抗体Ⅰ或单克隆抗体Ⅱ制备的CHI3L1抗体微孔酶标板，所述CHI3L1抗体微孔酶标板的制备方法为：

首先选用单克隆抗体Ⅰ或单克隆抗体Ⅱ任一种，用1XPH＝7.4的PBS缓冲液将其配置成0.5～1.5ng/ml的溶液A；

然后将溶液A滴至微孔酶标板之内，再将微孔酶标板放置于37℃培养箱内培养1.5～2h；

然后取出，用2％的BSA进行封闭，封闭完成后取出，并用1XPH＝7.4的PBS缓冲液洗涤，之后干燥0.5～1h，备用。

7.根据权利要求5所述的一种预测自体动静脉内瘘失功的试剂盒，其特征在于，包括单克隆抗体Ⅰ或单克隆抗体Ⅱ制备的CHI3L1检测抗体，所述CHI3L1检测抗体的制备方法为：

首先选用单克隆抗体Ⅰ或单克隆抗体Ⅱ中的一种，且确保与CHI3L1抗体微孔酶标板制备时选用的CHI3L1抗体不同，然后将选用的抗体进行稀释，再取稀释后抗体与生物素偶联，混合旋转2h；

然后将偶联后溶液倒入透析袋中，在1XPH＝7.4的PBS缓冲液中4℃恒温下透析24h，期间换透析液4次，之后收取透析袋内溶液，即获得高浓度CHI3L1检测抗体；

最后配置检测抗体保存液；然后将获得的高浓度检测抗体用检测抗体保存液稀释配制成0.2～1.0ng/ml的溶液待用。

8.根据权利要求7所述的一种预测自体动静脉内瘘失功的试剂盒，其特征在于，所述生物素的体积为26ul～60ul，生物素的浓度为1umol/L～10mmol/L；

与生物素偶联的稀释抗体体积为1ml，稀释抗体浓度为150ug/ml～2mg/ml；

所述检测抗体保存液的配方为：2.2～5.4g的NaH₂PO₄，22.15～31.08g的Na₂HPO₄·12H₂O，酪蛋白3～10g、0.15～0.35g的tween20、蒸馏水1L。