[发明专利]磁微粒化学发光检测试剂盒及其制备方法和应用

说明书

本发明实施例涉及一种磁微粒化学发光检测试剂盒及其制备方法和应用，涉及检测领域，包括Anti‑FITC羊多抗包被的磁珠、ALP标记的第一胃泌素释放肽前体单克隆抗体、FITC标记的第二胃泌素释放肽前体单克隆抗体、含有ProGRP重组抗原的标准品；其中，所述第一、第二胃泌素释放肽前体单克隆抗体为识别ProGRP抗原分子不同表位的单克隆抗体。本发明为磁微粒化学发光免疫法，采用ALP酶促发光，引用了FITC和Anti‑FITC对，并对制备方法及稀释液进行了改进，极大的提高产品的灵敏度、特异性和稳定性，降低了成本，解决了现有试剂盒准确度差、线性范围差等性能问题，解决了手动操作带来的人为误差，实现全自动反应，操作简单，整个反应周期短。

技术领域

本发明涉及检测领域，特别涉及一种磁微粒化学发光检测试剂盒、磁微粒化学发光检测试剂盒的制备方法及应用。

背景技术

公开于该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

胃泌素释放肽(GRP)最早是1978年从猪胃细胞分离出来的一种胃肠激素，它由27个氨基酸组成，具有促胃泌素分泌作用，ProGRP是GRP的前体结构，普遍存在于非胃窦组织、神经纤维、脑和肺的神经内分泌细胞中。ProGRP因部分氨基酸残基的不同分为3种分子亚型(ProGRP31-125、ProGRP31-118、ProGRP31-115)，但它们C-末端均有共同片段ProGRP31-98。研究发现，SCLC患者的肿瘤细胞能合成和释放GRP，并通过自分泌或细胞间的相互作用参与肿瘤的生长、转移过程。目前ProGRP作为SCLC(小细胞肺癌)的早期诊断、疗效判断及预后分析的指标。相比NSE，ProGRP有更高的敏感性和特异性。ProGRP与其它肿瘤标志物尤其是NSE联合运用能提高诊断率，并有助于判断治疗效果和预后，ProGRP另外可用于SCLC(小细胞肺癌)和NSCLC(非小细胞型肺癌)的鉴别。

目前对于ProGRP的体外诊断有放射免疫法(RIA)、酶免疫法(主要为ELISA)、化学发光法(CLIA)等，由于放射免疫法的物质放射性和酶免法灵敏度低等各种缺陷，将会逐渐被淘汰，化学发光法将成为主流。RIA因存在着放射性辐射和标记物放射衰变的问题，污染问题严重，试剂有效期短，操作复杂，极大地影响了其临床使用。ELISA因其传统的固相载体多为酶标板，固/液相反应接触面积小，反应不彻底，测量结果变异较大，空白限也较高，所以在目前对定量检测要求越来越高的情况下，其使用逐渐受到限制。

发明内容

发明目的

本发明的目的在于提供一种磁微粒化学发光检测试剂盒、磁微粒化学发光检测试剂盒的制备方法及应用，本发明将化学发光分析技术与磁性微粒分离技术相结合，采用FITC和ALP分别标记抗体，以直径3μm的偶联有抗FITC抗体的超顺磁性微粒作为分离试剂。ALP催化底物发光后，通过仪器测量发光强度。该技术继承了以ELISA为代表的传统免疫检测技术、无放射性污染、操作简便等优点，同时由于采用了磁微粒作为分离载体，用ALP作为标记酶，选用低空白限发光底物。试剂盒在空白限、线性范围、检测重复性等性能方面有了全面的提高。

解决方案

为实现本发明目的，本发明实施例提供了一种磁微粒化学发光检测试剂盒，包括Anti-FITC羊多抗包被的磁珠、ALP标记的第一胃泌素释放肽前体单克隆抗体、FITC标记的第二胃泌素释放肽前体单克隆抗体、含有ProGRP重组抗原的标准品；

其中，所述第一、第二胃泌素释放肽前体单克隆抗体为识别ProGRP抗原分子不同表位的单克隆抗体。

本发明的Anti-FITC羊多抗是指Anti-FITC抗原羊多克隆抗体。