[发明专利]一种高纯度辅酶Q10纯化工艺在审
申请号: | 202111132776.5 | 申请日: | 2021-09-27 |
公开(公告)号: | CN113754526A | 公开(公告)日: | 2021-12-07 |
发明(设计)人: | 田志杰;巴国政;王瑞霞;张清清;石海强 | 申请(专利权)人: | 神舟生物科技有限责任公司 |
主分类号: | C07C50/28 | 分类号: | C07C50/28;C07C46/10 |
代理公司: | 北京鼎承知识产权代理有限公司 11551 | 代理人: | 王义刚;赖庆梧 |
地址: | 010206 内蒙古自*** | 国省代码: | 内蒙古;15 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 纯度 辅酶 q10 纯化 工艺 | ||
1.一种高纯度辅酶Q10的纯化工艺,其特征在于,包括:
(1)粗品溶解:辅酶Q10粗品加入流动相溶解;
(2)色谱柱装填:液相色谱柱填料为C18或C8有机烃类键合硅胶或含有极性有机官能团的有机烃类键合硅胶;
(3)制备型高效液相色谱纯化:将溶解液上柱,经流动相进行洗脱,在紫外线波长275nm处检测,收集有紫外吸收的馏分;
(4)将合格馏分进行浓缩,得稀浸膏;
(5)结晶分离:用乙醇溶解稀浸膏,经粗结晶和精结晶,过滤得到辅酶Q10精结晶滤饼;
(6)干燥:将辅酶Q10精结晶滤饼干燥3~5h后得辅酶Q10成品。
2.根据权利要求1所述的纯化工艺,其特征在于,在步骤(1)中,所述辅酶Q10粗品,是由类球红细菌作为原始菌种,经过扩大培养获得发酵液,发酵液经过酸化、过滤、干燥后制成干菌丝,干菌丝用有机溶剂萃取、水洗、固相萃取、色谱分离、浓缩制得的辅酶Q10粗品。
3.根据权利要求1所述的纯化工艺,其特征在于,在步骤(2)中,使用2~3倍量乙醇或异丙醇等匀浆填柱,保压20~30min,乙醇或异丙醇循环冲洗20~30min,流动相冲洗30min。
4.根据权利要求1所述的纯化工艺,其特征在于,在步骤(3)中,所述流动相流速:1.0~8.0L/min;流动相为丙酮和甲醇的混合液。
5.根据权利要求1所述的纯化工艺,其特征在于,在步骤(3)中,丙酮:甲醇的体积比为20-40:60-80。
6.根据权利要求1所述的纯化工艺,其特征在于,在步骤(5)中,包括:
(1)粗结晶:加入滤饼体积的20~35倍的乙醇或甲醇、丙醇,浓度大于85%,搅拌升温溶解,降温至10~20℃,停止搅拌,结晶1~5h,离心,得到粗结晶滤饼;
(2)精结晶:加入粗结晶滤饼体积的20~35倍的乙醇或甲醇、丙醇),浓度大于95体积%,搅拌升温使粗结晶滤饼完全溶解,降温至10~20℃,结晶时间1~5h,离心得到精结晶滤饼。
7.根据权利要求6所述的纯化工艺,其特征在于,搅拌转速为20~60r/min。
8.根据权利要求1所述的纯化工艺,其特征在于,在步骤(6)中,使用干燥机进行干燥。
9.根据权利要求1所述的纯化工艺,其特征在于,在步骤(6)中,将精结晶滤饼加入一次双锥干燥机中,控制真空度-0.02~-0.09MPa、频率20Hz、温度30~40℃,干燥3~5h后得辅酶Q10成品。
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