[发明专利]一种用于检测乌司他丁的电致化学发光生物传感器

权利要求书

1.一种用于检测乌司他丁的电致化学发光生物传感器，其特征在于，所述电致化学发光生物传感器为三明治型传感器，以钛片为基础，钛片直接氧化后分别结合Ab1、乌司他丁和Ab2进行响应。

2.根据权利要求1所述的用于检测乌司他丁的电致化学发光生物传感器，其特征在于，所述电致化学发光生物传感器是采用如下方法制备而来的：

第1步：获得TiO₂ NTs；

第2步：制备Ab2/CC/MNPs；

第3步：制备Ab2/CC/MNPs/Ab1/TiO₂ NTs电极；

第4步：构建用于检测乌司他丁的电致化学发光生物传感器。

3.根据权利要求2所述的用于检测乌司他丁的电致化学发光生物传感器，其特征在于，在第1步中，采用阳极氧化法获得TiO₂ NTs，具体包括以下步骤：

(1)清洗钛片：将裁剪好的钛片依次在乙醇和超纯水中各清洗5min，然后在由HF、HNO₃和H₂O以体积比1:4:5混合而成的混合酸溶液中继续超声1～5min，再在乙醇和水中各超声5min；

(2)阳极氧化：将清洗干净的钛片浸到质量浓度为0.5％的HF溶液中，在20V的直流电位下，以钛片为阳极，以铂片为阴极，两个电极之间的距离控制在3cm，室温下氧化2h；

(3)煅烧：将经过阳极氧化后的钛片在超纯水中超声清洗，用氮气吹干，然后放入马弗炉中500℃煅烧1h，冷却之后在超纯水中超声1min，4℃保存备用。

4.根据权利要求2所述的用于检测乌司他丁的电致化学发光生物传感器，其特征在于，在第2步中，制备Ab2/CC/MNPs具体包括以下步骤：

(1)清洗和活化CC：取10mgCC溶于10mL含有250mg EDC和120mg NHS的1-甲基咪唑中，室温活化1.5h，清洗后离心分离CC，之后将CC放在10mL PBS中获得活化的CC；

(2)合成CC/MNPs：将上一步获得的活化的CC与200mg EDC和100mg NHS进行混合，室温放置1.5h，向混合物中加入300μL浓度为4.0mg/mL的Fe₃O₄ MNPs，室温继续放置2h，形成CC/MNPs纳米复合材料，将得到的混合溶液进行磁力分离，用乙醇洗涤固体数次，将该固体命名为CC/MNPs，将CC/MNPs用乙醇调成浓度为1.0mg/mL的溶液备用；

(3)合成Ab2/CC/MNPs：取1mL浓度为1.0mg/mL的CC/MNPs与150μL Ab2混合，在4℃反应12h，加入100μL质量浓度为3％的BSA溶液于混合溶液中，在4℃再反应4h，最后离心分离后将固体分散于1mL PBS中，得到Ab2/CC/MNPs分散液。