[发明专利]一种提高酿酒酵母中花青素合成效率的方法

权利要求书

1.一种可利用二氢槲皮素合成花青素的酿酒酵母，其特征在于，表达来源于Fragaria ananassa的二氢黄酮醇还原酶FaDFR、来源于P.hybrida的花青素合成酶PhANS、来源于Dianthus caryophyllus的花青素合成酶Dc3GT和来源于Malus domestica的花青素转运蛋白MdGSTF6，还敲除了内源的花青素降解酶基因EXG1；所述二氢黄酮醇还原酶的氨基酸序列如Genbank登录号为AHL46451.1所示；所述来源于P.hybrida的花青素合成酶的氨基酸序列如Genbank登录号AAY15743.2所示；所述来源于Dianthus caryophyllus的花青素合成酶的氨基酸序列如Genbank登录号BAD52003.1所示；所述花青素转运蛋白的氨基酸序列如Genbank登录号NP_001315851.1所示；所述EXG1的核苷酸序列如Gene ID 851007所示。

2.根据权利要求1所述的酿酒酵母，其特征在于，含二氢槲皮素到矢车菊色素-3-O-葡萄糖苷合成途径的重组质粒，所述重组质粒以pY26为出发质粒，在启动子P_TDH1下游连接二氢黄酮醇还原酶基因FaDFR和花青素合成酶基因Dc3GT，并在启动子P_GAL1/10下游连接PhANS。

3.根据权利要求2所述的酿酒酵母，其特征在于，所述二氢黄酮醇还原酶基因FaDFR的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述花青素合成酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；所述花青素合成酶基因Dc3GT的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

4.根据权利要求3所述的酿酒酵母，其特征在于，以酿酒酵母CENPK2-1D为出发菌株，在基因组上缺失或沉默了GAL80。

5.根据权利要求4所述的酿酒酵母，其特征在于，以酿酒酵母CENPK2-1D为出发菌株，敲除了GAL80位点。

6.根据权利要求1~5任一所述的酿酒酵母，其特征在于，所述花青素转运蛋白通过重组质粒表达；所述重组质粒是在PRS425-TEF1质粒的P_TEF1启动子下游连接了MdGSTF6基因。

7.一种生产花青素的方法，其特征在于，将权利要求1~6任一所述的酿酒酵母接种至含二氢槲皮素的培养基中，在25~30℃培养至少24 h。

8.权利要求1~6任一所述的酿酒酵母在生产含花青素的产品中的应用。