[发明专利]一株产CBD的工业大麻内生真菌及其应用

说明书

一株产CBD的工业大麻内生真菌及其应用，涉及微生物领域，尤其涉及一株工业大麻内生真菌及其应用。是要解决现有产CBD的方法难以满足市场需求的问题。该内生真菌为极细链格孢菌HMJ01。保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址是武汉市武汉大学，保藏日期为2021年8月26日，保藏编号为CCTCC M20211091。本发明的工业大麻内生真菌能够抑制细菌活性，且能够发酵产大麻二酚。本发明应用于微生物发酵产大麻二酚领域。

技术领域

本发明涉及微生物领域，尤其涉及一株工业大麻内生真菌及其应用。

背景技术

大麻二酚CBD作为工业大麻中的非成瘾性成分，是CB₁和CB₂受体的拮抗剂，不仅可以有效改善THC对机体产生的致幻作用，还以其独特的精神作用及抗肿瘤等方面的活性，吸引了众多学者的关注，现已逐渐成为食品、药品领域中的明星化合物。

关于CBD的生产，最初是采用柱色谱等分离技术从工业大麻原料中直接进行提取分离，但这样的提取分离工艺路线复杂，不利于工业化生产，且上述工艺均为从高CBD、低THC的工业大麻种子资源中直接提取，所生产的CBD，产率较低，难以满足市场的需求。

随着对CBD需求量的增加，研究学者开始致力于CBD的化学合成。但CBD的纯度不高，而且还有副产物生成。

发明内容

本发明是要解决现有化学合成CBD的方法难以满足市场需求的问题，提供一株产CBD的工业大麻内生真菌及其应用。

本发明提供一株工业大麻内生真菌，为极细链格孢菌(Alternaria tenuissima)HMJ01。保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏地址是武汉市武汉大学，保藏日期为2021年8月26日，保藏编号为CCTCC NO：M20211091。

本发明极细链格孢菌HMJ01在PDA平板培养基上菌落初期灰白色，后变为黑色，菌丝密集，絮状，基质褐色，生长迅速。

本发明极细链格孢菌HMJ01为好氧菌，能够在PDA培养基上生长，最适生长温度为28℃，最适pH值自然。

本发明极细链格孢菌HMJ01通过ITS序列比对分析，与Alternaria tenuissimaMZ351314的相似性达到了99％。通过结合菌体形态特征、生长条件、生理生化特征和分子鉴定结果确定，本发明的工业大麻内生真菌HMJ01属于极细链格孢菌(Alternariatenuissima)。

本发明还提供极细链格孢菌HMJ01在抑制细菌活性中的应用。

进一步的，所述细菌为大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、短小芽孢杆菌、铜绿假单孢菌、单增李斯特菌、肺炎克雷伯菌、屎肠球菌和粪肠球菌。

进一步的，极细链格孢菌HMJ01对屎肠球菌的抑菌圈直径可达10.50±0.30。

本发明还提供极细链格孢菌HMJ01在发酵产CBD中的应用。

本发明的有益效果：

本发明工业大麻内生真菌为极细链格孢菌(Alternaria tenuissima)HMJ01，极细链格孢菌HMJ01对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、短小芽孢杆菌、铜绿假单孢菌、单增李斯特菌、肺炎克雷伯菌、屎肠球菌和粪肠球菌均有一定的抑菌活性作用，其中对屎肠球菌抑菌效果最强，对屎肠球菌的抑菌圈直径可达10.50±0.30。同时本发明极细链格孢菌HMJ01的发酵液中含有大麻二酚CBD，为采用HMJ01菌株发酵的方法生产CBD奠定了基础。

附图说明

图1为工业大麻内生真菌HMJ01的菌落形态图；

图2为工业大麻内生真菌HMJ01的菌丝形态图；

图3为工业大麻内生真菌HMJ01的PCR扩增产物电泳图；