[发明专利]一种核酸等温扩增检测试剂、试剂盒、检测系统及方法有效
申请号: | 202111139072.0 | 申请日: | 2021-09-27 |
公开(公告)号: | CN113981139B | 公开(公告)日: | 2022-11-25 |
发明(设计)人: | 汪大明;雷洋;陈伟川;陈寿长;曾晓欣;蔡文凯;史江伟;石岩;陈凯君;黄认训;白佳委 | 申请(专利权)人: | 厦门健康工程与创新研究院 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11;C12M1/34;C12M1/38;C12M1/00;C12R1/93 |
代理公司: | 厦门仕诚联合知识产权代理事务所(普通合伙) 35227 | 代理人: | 程劲竹 |
地址: | 361000 福建省厦门市海沧区后祥路71*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 核酸 等温 扩增 检测 试剂 试剂盒 系统 方法 | ||
1.一种核酸等温扩增检测系统,其特征在于:包括:
预装有核酸等温扩增检测试剂的反应管,所述核酸等温扩增检测试剂为冻干粉末态,其由以下原料冻干制成:缓冲液、MgCl2、dATP、dGTP、dCTP、dTTP、dUTP、UNG酶、Bst DNA聚合酶、逆转录酶、海藻糖、蔗糖、甘露醇、Tween 20、盐酸胍、显色剂及待检病毒的LAMP的引物组合物;
可视化核酸等温扩增装置,所述装置包括壳体和设置在所述壳体内的加热座,所述加热座内设有由上至下贯穿所述加热座的反应管固定孔,所述反应管固定孔用于放置所述反应管,所述壳体包括相互连接的上盖和下壳体,所述下壳体内装设有反射镜,所述反射镜设置在所述反应管固定孔的下方以供观察反应管内反应溶液的颜色;所述下壳体表面还设有观察窗,所述观察窗设置在所述反射镜的外侧,所述观察窗与所述反射镜之间的夹角为0-90°。
2.如权利要求1所述的核酸等温扩增检测系统,其特征在于:所述下壳体的侧壁还设有一散热窗,所述下壳体内部靠近所述散热窗处设有第一散热风扇,所述第一散热风扇用于将热空气吹向所述下壳体外部,所述加热座的一侧底部设有第二散热风扇,所述一侧未设置反应管固定孔,所述第二散热风扇用于将冷空气吹向所述加热座。
3.如权利要求1所述的核酸等温扩增检测系统,其特征在于:所述壳体还包括后座壳,所述上盖为透明材料制成,所述上盖与所述后座壳枢接;所述后座壳的表面设有显示窗口和控制键,所述后座壳的内部设有温度控制主板,所述温度控制主板与所述加热座控制连接。
4.如权利要求1所述的核酸等温扩增检测系统,其特征在于:所述待检病毒为博卡病毒,所述引物组合物包括SEQ ID NO.1-6所示的引物。
5.如权利要求1所述的核酸等温扩增检测系统,其特征在于:所述待检病毒为呼吸道合胞病毒,所述引物组合物包括SEQ ID NO.7-12所示的引物。
6.如权利要求1所述的核酸等温扩增检测系统,其特征在于:所述待检病毒为新型冠状病毒,所述引物组合物包括SEQ ID NO.13-24所示的引物。
7.一种核酸等温扩增检测方法,其特征在于:其用于在非疾病诊断目的的病原微生物检测,包括以下步骤:
S1、将待检样本加入预装有核酸等温扩增检测试剂的反应管中,所述核酸等温扩增检测试剂为冻干粉末态,其由以下原料冻干制成:缓冲液、MgCl2、dATP、dGTP、dCTP、dTTP、dUTP、UNG酶、Bst DNA聚合酶、逆转录酶、海藻糖、蔗糖、甘露醇、Tween 20、盐酸胍、及待检病毒的LAMP的引物组合物;
S2、将步骤S1所述的反应管置于LAMP反应装置中,在63℃~68℃反应10-30min,所述反应装置包括壳体和设置在所述壳体内的加热座,所述加热座内设有由上至下贯穿所述加热座的反应管固定孔,所述反应管固定孔用于放置所述反应管,所述壳体包括相互连接的上盖和下壳体,所述下壳体内装设有反射镜,所述反射镜设置在所述反应管固定孔的下方以供观察反应管内反应溶液的颜色;所述下壳体表面还设有观察窗,所述观察窗设置在所述反射镜的外侧,所述观察窗与所述反射镜之间的夹角为0-90°。
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