[发明专利]含脂肪干细胞外泌体的银离子藻酸盐敷料及其制备方法

权利要求书

1.一种含脂肪干细胞外泌体的银离子藻酸盐敷料，其特征在于：

由三层构成，从上至下依次包括藻酸盐敷料层一(1)、脂肪干细胞外泌体层(2)和藻酸盐敷料层二(3)；

所述藻酸盐敷料层一(1)双面涂覆银离子层。

2.根据权利要求1所述的一种含脂肪干细胞外泌体的银离子藻酸盐敷料，其特征在于：

所述藻酸盐敷料层一(1)、脂肪干细胞外泌体层(2)和藻酸盐敷料层二(3)通过医用生物胶将三块敷料外围进行粘合。

3.一种含脂肪干细胞外泌体的银离子藻酸盐敷料及其制备方法,其包括如下步骤：

(1)外泌体提取：

1)脂肪干细胞分离和培养：获得脂肪来源的间充质干细胞，进行消化后获取原代细胞进行继代培养，取继代培养后的脂肪干细胞备用；

2)外泌体提取：取脂肪来源的间充质干细胞，置于含10％胎牛血清的DMEM培养基中培养，采用超速离心法提取间充质干细胞释放的外泌体；

(2)藻酸盐敷料的制备：

1)藻酸盐溶液的制备：将藻酸盐在30℃-40℃浸泡2h-3h预溶解，然后在温度为40℃-60℃、转速为200r/min-400r/min的条件下搅拌3h-4h或者在温度为30℃-60℃、转速为200r/min-400r/min的条件下搅拌4h-7h,最后在2-3kg压力下采用滤布过滤后，即得藻酸盐溶液；然后真空脱泡12h-24h,随后升温至60℃-80℃,即得纺丝原液；

(2)藻酸盐纤维的制备：在温度为60℃-80℃条件下，用孔数为200-500的喷丝孔喷丝，纺丝速度为5T00m/min,然后在含有质量分数5％-10％金属离子水溶液或醇溶液的凝固浴中进行凝固，凝固后进行拉伸，水洗，绕卷，在温度为70℃-100℃的热空气下干燥藻酸盐纤维；制得的藻酸盐纤维采用针刺方式制成敷料，得到藻酸盐敷料层二(3)；

(3)含银离子的藻酸盐敷料层一(1)的制备：将含银抗菌剂的水溶液超声喷涂在所述藻酸盐敷料层一(1)的正反两面再经干燥处理，得到银离子藻酸盐创伤敷料；

(4)夹心敷料的制备：

1)在具备无菌操作的条件下，取1块无菌无纺布，将脂肪干细胞外泌体均匀浸润在至无纺布上，以完全浸湿且不聚集水滴体为准；

2)再取用上述方法制出的藻酸盐敷料层一(1)和藻酸盐敷料层二(3)裁剪成无纺布大小，用医用生物胶将三块敷料外围粘合，其中脂肪干细胞外泌体层位于中间；低温保存即可。

4.根据权利要求3所述的一种含脂肪干细胞外泌体的银离子藻酸盐敷料及其制备方法，其特征在于：

所述步骤(4)中采用超声喷涂的方式使银离子更加均匀的分布在敷料表面。

5.根据权利要求3所述的一种含脂肪干细胞外泌体的银离子藻酸盐敷料及其制备方法，其特征在于：

所述含银抗菌剂的水溶液及其制备方法如下：

称取80g载银磷酸锆，加入5kg纯化水中，搅拌溶解均匀，得到抗菌剂溶液。

6.根据权利要求5所述的一种含脂肪干细胞外泌体的银离子藻酸盐敷料及其制备方法，其特征在于：

所述超声喷涂的喷涂参数为：移动速度为28mm/s，单面喷涂，接受轴转速为800r/min；经喷涂后，得到敷料；

将敷料低温(37℃)干燥，裁切，铝箔袋热封包装，采用电子束辐射灭菌，剂量为20kGy；干燥后，得到银离子藻酸盐创伤敷料。