[发明专利]一种预测玉米植株氮素状态的方法及引物组

权利要求书

1.一种预测玉米植株氮素状态的方法，其特征在于，具体步骤如下：

分别以郑58或玉米样品cDNA为模板，进行实时定量PCR检测；再以郑58中基因Zm00001d039049、基因Zm00001d037680、基因Zm00001d024281的表达量，与样品对应基因表达量进行比较，获得样品中基因Zm00001d039049、基因Zm00001d037680、基因Zm00001d024281的相对表达量，分别计为x4、x3、x2；

将x4、x3、x2带入函数Y=1.143+0.017*x2+0.017*x3-0.302*x4，即获知样品氮含量预测值Y；

若Y＞1.30，则认为玉米生长达到正常状态，不需要补充氮肥；若Y＜1.22，则认为玉米生长未达到正常状态，需要补充氮肥。

2.如权利要求1所述预测玉米植株氮素状态的方法，其特征在于，步骤2）所述实时定量PCR检测是指，以郑58或玉米样品cDNA为模板，分别以基因Zm00001d039049、或基因Zm00001d037680、或基因Zm00001d024281的上游引物为引物I，以基因Zm00001d039049、或基因Zm00001d037680、或基因Zm00001d024281的下游引物为引物II，进行实时定量PCR检测。

3.根据权利要求2所述预测玉米植株氮素状态的方法，其特征在于，步骤2）所述实时定量PCR检测是指，

PCR反应体系：2×ChamQ Universal SYBR qPCR Master Mix 10微升；10 µM的引物I0.4微升；10 µM的引物II 0.4微升；浓度为100ng/微升的cDNA， 1微升；ddH₂O，8.2微升；

PCR反应程序：95°C预变性3分钟；95℃变性30秒，60℃退火20秒，72℃延伸30秒，40个循环。

4.根据权利要求2所述预测玉米植株氮素状态的方法，其特征在于，步骤2）中基因Zm00001d039049上游引物、下游引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示；

基因Zm00001d037680上游引物、下游引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.3和SEQ IDNO.4所示；

基因Zm00001d024281上游引物、下游引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.5和SEQ IDNO.6所示。

5.一组用于预测玉米植株氮素状态的引物，包括：

用于检测Zm00001d039049基因的上游引物和下游引物，他们的核苷酸序列分别如SEQID NO.1和SEQ ID NO.2所示；

用于检测Zm00001d037680基因的上游引物和下游引物，他们的核苷酸序列分别如SEQID NO.3和SEQ ID NO.4所示；

用于检测Zm00001d024281基因的上游引物和下游引物，他们的核苷酸序列分别如SEQID NO.5和SEQ ID NO.6所示。